[发明专利]用于木材加工的果胶酶

摘要

本发明涉及一种用于木材加工的果胶酶，属于生物发酵工程技术领域。本发明利用保藏编号CCTCC M2015032的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）HS047，通过种子菌体培养、发酵培养得到用于木材加工的果胶酶。本发明的优点在于：1、利用完全适应植物内部环境的内生菌为出发菌株，制备出在pH值4.5-5.5环境能够充分发挥果胶酶活性的果胶酶溶液，对于实现、促进木质材料的生物加工奠定基础；2、能高效用于木材加工的果胶酶，对于实现生物制浆、绿色纤维分离和生物纺织均具有一定的推动和促进作用。

主权项

用于木材加工的果胶酶，其特征在于该果胶酶经如下步骤得到：a.出发菌株：甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)HS047，保藏编号CCTCC M 2015032；b.种子菌体培养种子培养基组成：以g/1000ml计，果胶4g,酵母粉4g,麦芽粉3g,琼脂粉14g，用蒸馏水配至1000ml，用灭菌锅在121℃条件下灭菌30min后，用倾斜法倒至经灭菌锅121℃条件下灭菌60min并已干燥的培养皿中；种子菌体培养：待种子培养基冷却，将菌体用竹签接种于培养皿的种子培养基上，在30‑37℃培养箱中培养24小时，用于种子菌体的培养；c.发酵培养发酵培养基的组成，以g/1000ml计，果胶酶底物0.4g，葡萄糖3.6g，酵母粉4g,麦芽粉3g,MgSO₄0.5g，NaCl 0.5g用蒸馏水配至1000ml，利用0.01％HCl调pH值至6.0；后分装于250ml的锥形瓶中，每瓶装200ml的培养基，在121℃条件下灭菌30min，待培养基冷却至室温后；将b步骤的菌龄为24h的菌体，用竹签接种1环至发酵培养基中，在摇床温度30‑37℃、转速200r/min，发酵24h得到果胶酶的粗酶液；将果胶酶粗酶液利用离心机和超滤膜初步分离纯化后，利用DNS法进行果胶酶酶活的测试；发酵培养基中的果胶酶底物为：果胶、或柚子粉、或木粉、或麸皮粉、或大麻秆粉。