[发明专利]一种人支气管上皮细胞株HBE-TT

摘要

本发明提供了一株新的人支气管上皮细胞株HBE‑TT。该细胞株保藏在中国典型培养物保藏中心(武汉)，保藏编号为CCTCC NO:C201560。经鉴定，HBE‑TT细胞株纯度良好，无杂细胞污染，并且区别于现有的其它所有细胞株。此外，该永生化细胞保留了原代支气管上皮细胞的典型特征，无支原体污染，并且未呈现恶性转化特征，提示HBE‑TT细胞在体外传代培养过程中可以保持性状稳定。HBE‑TT细胞有望成为深入探讨环境有害因素暴露所导致的肺部疾病发生发展的分子机制和药理学研究的有力工具，对探究环境有害因素对人体肺脏的健康损害效应、风险评估、以及新药开发有重要意义。

主权项

1.一种人支气管上皮细胞株，其特征在于，命名为人支气管上皮细胞株HBE‑TT，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C201560；所述人支气管上皮细胞株HBE‑TT使用的质粒包括pBabe‑hyg‑hTERT和pBABE‑neo‑largeTcDNA；所述人支气管上皮细胞株的制备方法包括如下步骤：1)原代支气管上皮细胞的获取和培养；2)细胞永生化，包括接种并转染包装细胞、接种靶细胞、收集病毒上清液并感染靶细胞和阳性细胞筛选的步骤；所述接种并转染包装细胞的步骤如下：以1×106/皿的密度接种293T细胞于10cm培养皿，24h后将pBABE‑neo空载体、pBABE‑neo‑largeTcDNA、pBABE‑hyg‑hTERT和pCL‑ampho四种质粒的浓度统一调整为1μg/μL，然后用FuGENE‑6进行转染，按如下比例配制反应体系：