[发明专利]一种酶法水解蒙花苷制备金合欢素的方法在审
申请号: | 201510451784.4 | 申请日: | 2015-07-28 |
公开(公告)号: | CN106701856A | 公开(公告)日: | 2017-05-24 |
发明(设计)人: | 杨凌;王平;葛广波;窦同意;崔攀 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12P17/06 | 分类号: | C12P17/06 |
代理公司: | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司21001 | 代理人: | 张晨 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶促水解蒙花苷制备相应的苷元金合欢素的方法,属于生物工程领域。该方法包括制备粗酶液、酶解和纯化步骤,具体为(1)粗酶液的制备将纤维化纤维细菌接种于液体培养基中,30℃培养40h,9000g离心10min后取上清,进行硫酸铵沉淀,收集20%-40%的组分,用缓冲液重新溶解即得;(2)酶解以蒙花苷为原料,利用溶解后的粗酶液对其转化,使7位的β-D-葡萄糖苷键被水解得到金合欢素;(3)金合欢素的制备待反应结束后,将上述转化液与2倍体积的甲醇混合,加热至60度重复提取3-5次,收集提取液冷却结晶即得到金合欢素。本方法具有反应条件温和、专一性强、高效低成本等优点,所得的金合欢素纯度在98%以上。 | ||
搜索关键词: | 一种 水解 蒙花苷 制备 金合欢 方法 | ||
【主权项】:
一种酶法水解蒙花苷制备金合欢素的方法,其特征在于包括制备粗酶液、酶解和纯化步骤,具体为:(1)粗酶液的制备:将纤维化纤维细菌接种于液体培养基中,30℃培养40h,9000g离心10min后取上清,进行硫酸铵沉淀,收集20%‑40%的组分,用缓冲液重新溶解即得;(2)酶解:以蒙花苷为原料,利用溶解后的粗酶液对其转化,使7位的β‑D‑葡萄糖苷键被水解得到金合欢素;(3)金合欢素的制备:待反应结束后,将上述转化液与2倍体积的甲醇混合,加热至60度重复提取3‑5次,收集提取液冷却结晶即得到金合欢素。
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