[发明专利]一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系及其制备方法

摘要

本发明公开了一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系及其制备方法，技术方案包括以下步骤水热法制备石墨烯量子点；以石墨烯量子点负载抗癌药物；进行药物缓释实验并进行载药体系的细胞毒性测试。本发明采用水热法制备的石墨烯量子点作为药物载体负载表阿霉素，大幅度地提高了药物的负载率，表现出对肿瘤Hela细胞很好的抑制作用。该载药体系的制备方法操作简单、反应条件温和、药物装载率高，可望在生物医药领域有广阔的应用前景。

主权项

一种负载表阿霉素的石墨烯量子点载药体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：水热法制备石墨烯量子点；利用有机化合物芘在热浓硝酸条件下的硝化作用，稀释过滤除酸后，得到黄色的1,3,6‑三硝基芘；利用配制的水合肼和氨水修饰改性；通过超声处理和高压反应釜加热合成水溶性石墨量子点产物GQDs；最后过滤，在真空条件下加热干燥，得到纯化的绿色石墨烯量子点GQDs；步骤2：将表阿霉素和石墨烯量子点水溶液分别添加到PH＝7.4的PBS磷酸缓冲溶液中，将混合液超声分散，混合均匀，在黑暗中不断搅拌，振荡12～24h，获得载有表阿霉素的石墨烯量子点溶液；将此溶液离心，取沉淀物进行真空干燥，干燥后得到石墨烯量子点载药体系，备用；其中：表阿霉素在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为1mg：10ml；石墨烯量子点在PBS磷酸缓冲溶液中的质量体积比为1mg：10ml；所得到的石墨烯量子点载药体系中，表阿霉素：石墨烯量子点质量比1:0.5～1:2；步骤3：将石墨烯量子点载药体系进行药物缓释实验；称取石墨烯量子点载药体系放入适量去离子水中，平均分成两等分，将两份混合液分别置于pH＝5.5和pH＝7.4的磷酸缓冲溶液中，进行缓释实验；将溶液放在全温度振荡培养箱中，每隔一定时间用移液枪量取样品测定药物释放量,并且补加磷酸缓冲溶液；表阿霉素的浓度为0.005～0.02mg/ml，载药体系的浓度为0.2～1mg/ml；步骤4：将石墨烯量子点载药体系与宫颈癌Hela细胞共培育，用MTT法检测石墨烯量子点载药体系细胞毒性；在装有石墨烯量子点载药体系的EP管中，加入75％乙醇消毒，备用；将对数期生长的Hela细胞接种于96孔板，利用DMEM高糖完全培养基进行培养；培养24h后，分别加入不同浓度的石墨烯量子点载药体系；同时设置只加入DMEM高糖完全培养基作为对照组，未接种细胞作为空白组，每组设置6个复孔，分别继续培养24h，每孔加入MTT溶液，培养箱内继续培养4h后，弃去孔内的培养基，然后每孔加入二甲基亚砜DMSO，置摇床避光低速振荡，使结晶物充分溶解；利用酶标仪在490nm波长下测定吸光值OD。