[发明专利]一种预测家禽种蛋受精率的方法

摘要

本发明涉及的是一种预测家禽种蛋受精率的方法，这种预测家禽种蛋受精率的方法(1)分开种蛋的卵子和卵清蛋白；(2)用1%NaCl溶液浸泡卵子，除去卵清蛋白；(3)在卵子非胚盘区域偏下穿刺，形成几个小洞；(4)沿胚盘周围距离胚盘边缘至少1cm的区域将该部分卵黄膜切下，得到卵黄膜；(5)将卵黄膜滴入1%NaCl并展平；(6)吸走NaCl液体，滴入20%福尔马林溶液；(7)10‑20秒后，吸走福尔马林溶液，加入几滴Schiff's溶液染色；(8)在光学显微镜下观察经过精卵互作之后形成的微孔数量；(9)重复步骤(1)‑(8)，对每批次的种蛋逐个统计微孔数量，若种蛋卵黄膜上微孔数平均为5，则种蛋受精率为70%左右；若微孔数低于0.5，则种蛋受精率接近于零。本发明能够较准确预测种蛋的受精率。

主权项

一种预测家禽种蛋受精率的方法，其特征在于：这种预测家禽种蛋受精率的方法：(1)将公鸡的精液混合稀释，每只母鸡人工输入0.05ml精液，人工输精48小时后开始收集种蛋；轻轻打开种蛋蛋壳的钝端，将蛋内容物轻轻倒出，避免将卵子划破；利用蛋黄分离器分开卵子和卵清蛋白；(2)在盛有质量百分比浓度为1％NaCl溶液的烧杯中，浸泡卵子3分钟，除去多余的卵清蛋白；(3)转移步骤(2)处理后的卵子到一个培养皿中，用手轻轻转动卵子使胚盘区域正好朝上放置，用解剖针在非胚盘区域偏下穿刺，形成几个小洞，降低内部卵黄压力；(4)用小剪刀，沿胚盘周围距离胚盘边缘至少1cm的区域将该部分卵黄膜切下，在质量百分比浓度为1％NaCl溶液中清洗干净，除去全部卵黄后得到卵黄膜；(5)将步骤(4)分离得到的卵黄膜放置在载玻片上，滴入数滴1％NaCl，用解剖针轻轻将卵黄膜展平，避免形成皱褶；在载玻片上滴入质量百分比浓度为3％的多聚甲醛，用盖玻片封闭；(6)用吸管吸走NaCl液体，滴入3～5滴20％福尔马林溶液；(7)10‑20秒后，用吸管吸走福尔马林溶液，加入几滴Schiffs溶液，使卵黄膜充分染色，控制染色时间，以免染色太深，影响观察；(8)在卵黄膜上加上盖玻片，在100倍光学显微镜下观察经过精卵互作之后形成的微孔数量，微孔直径为10～30ul；统计每个卵黄膜上胚盘区域1.35mm2面积内微孔数量；(9)重量步骤(1)‑(8)，对每批次的种蛋逐个统计每个卵黄膜上胚盘区域1.35mm2面积内微孔数量，来预测本批次种蛋受精情况；若种蛋卵黄膜上微孔数平均为5，则种蛋的受精率为70％左右；若微孔数低于0.5，则种蛋受精率接近于零；所述的步骤(9)中，卵黄膜上的微孔数和种蛋受精率的回归曲线方程如下：y＝0.0281x3‑1.0434x2+13.813x+23.884其中，y是种蛋受精率，x是种蛋卵黄膜上的微孔数，该回归曲线的R2＝0.98。