[发明专利]一种辣椒花药培养直接成苗的方法

摘要

一种辣椒花药培养直接成苗方法，其步骤包括试材选定、选取花蕾、花蕾预处理、培养基制备与分装、花蕾消毒、剥取花药、花药培养与胚状体培养；其中，所述培养基分别由MS和SNGM两种基本培养基添加相同的外源物质所制得，外源物质为培养基重量3%的麦芽糖、0.8%的琼脂、0.25%的活性炭、4mg/L的NAA以及1～2mg/L的6-BA，所述的花药培养为两种培养基转移一次成苗法，并采用35℃高温刺激，连续暗培养，所述胚状体培养为弱光照培养。本发明对辣椒花药培养直接成苗所采取的方法步骤简单、实用，用时短，效率高，特别适用于辣椒育种工作，通过此方法成苗率高达6.5%。

主权项

一种辣椒花药培养直接成苗方法，选取杂交一代辣椒品种，在开花盛期选取处于单核靠边期的花蕾，并装入自封袋中置于4 ℃环境中1～3 d，然后对花蕾进行消毒并剥取花药，将所获得花药接种于培养基中进行花药培养形成胚状体，所述培养基是通过在基本培养基中添加外源物质所制得的，其特征在于：所述的培养基制作和花药接种、培养方法，并且，经花药培养出现胚状体之后，再进行胚状体培养，最终使其形成根叶芽俱全的再生植株；其中，所述培养基的制作方法为：分别选择MS培养基和SNGM培养基作为两种基本培养基，其中以MS培养基为基本培养基制得M培养基，以SNGM培养基为基本培养基制得S培养基，M培养基和S培养基中添加的外源物质相同，均为各自培养基重量3%的麦芽糖、0.8%的琼脂、0.25%的活性炭、4 mg/L的NAA以及1～2 mg/L的6‑BA，并且，M培养基和S培养基的pH均为6.0，再将M培养基和S培养基于121 ℃、1.1 MPa条件下灭菌20 min后，冷却至60～70 ℃，对M培养基和S培养基分别进行分装，每100 mL三角瓶中倒入30 mL的M培养基或S培养基；所述的花药接种与培养的方法为：（1）花药接种：将所获得的花药接种在盛有M培养基的三角瓶中，每瓶接种5～6枚花药，将三角瓶封口；（2）花药培养：将上述接种后的三角瓶放在35 ℃的培养箱中暗培养，7 d后，再将其进行光照培养，光照强度为2500 Lx，温度为25 ℃，待三角瓶中的花药膨大后，将膨大的花药转接于S培养基中，然后置于25 ℃培养室中进行暗培养，至胚状体出现；所述的胚状体培养方法为：对花药培养所产生的胚状体再进行弱光照培养，光照强度为2000 Lx，每天光照10 h，直至形成根叶芽俱全的再生植株。