[发明专利]用于七种猪病病原鉴定的基因芯片及其检测方法

摘要

本发明公开了一种用于七种猪病病原鉴定的基因芯片及其检测方法，可以检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪传染性胃肠炎病毒。本发明通过标准毒株基因组序列分析设计PCR引物，对目的基因克隆及测序分析，设计特异性探针，构建了检测用基因芯片，并优化获得检测体系。本发明旨在建立一种灵敏度高、特异性强、节时省力并且易于观察结果的微阵列芯片用于检测七种重要猪病病原的方法。

主权项

用于七种猪病病原鉴定的基因芯，包括：PCR反应混合液、Taq聚合酶、PCR阳性对照、PCR阴性对照、ddH₂O、检测芯片、芯片探针的点样分布、芯片盖片、杂交液、杂交阳性对照、杂交盒，采用基因芯片微量点样技术，将待测样品探针与各种质控探针固定在经过化学修饰的基片上，形成的微阵列，其特征在于：所述微阵列包括质控探针区和待测样品探针区，其中所述质控探针区内设置下述分区：点样位置质控分区（P1），包含至少一个点样位置质控探针:SEQ ID NO.8；杂交阳性质控分区（P2），包含至少一个杂交阳性质控探针:SEQ ID NO.9；杂交阴性质控分区（N），包含点样缓冲液；所述待测样品探针区内设置下述至少一个待测样品探针的分区：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌探针分区（1），副猪嗜血杆菌探针分区（2），猪肺炎支原体探针分区（3），猪圆环病毒2型探针分区（4），猪繁殖与呼吸综合征病毒探针分区（5），猪瘟病毒探针分区（6），猪传染性胃肠炎病毒探针分区（7）.各个探针序列如下：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌探针：SEQ ID NO.1；副猪嗜血杆菌探针：SEQ ID NO.2；猪肺炎支原体探针：SEQ ID NO.3；猪圆环病毒2型探针：SEQ ID NO.4；猪繁殖与呼吸综合征病毒探针：SEQ ID NO.5；猪瘟病毒探针：SEQ ID NO.6；猪传染性胃肠炎病毒探针：SEQ ID NO.7。