[发明专利]碳酸镧分离富集核酸的方法及用途有效
申请号: | 201510482164.7 | 申请日: | 2015-08-07 |
公开(公告)号: | CN105087545B | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 康晓燕;贺安琪;徐怡庄 | 申请(专利权)人: | 宁海德宝立新材料有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙)11426 | 代理人: | 刘冬梅,路永斌 |
地址: | 315602 浙江省宁波市宁海县*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了碳酸镧分离富集核酸的方法及用途,该方法将碳酸镧固体高速剪切处理,制备成碳酸镧纳米颗粒;在缓冲溶液一中,将上述碳酸镧纳米颗粒与核酸结合生成碳酸镧纳米颗粒‑核酸复合物沉淀,从而与其它溶于缓冲溶液一的非核酸成分分离,再用缓冲溶液二进行洗脱,得到纯度或浓度较高的核酸,从而实现核酸的分离富集;使用过的碳酸镧纳米颗粒经稀酸淋洗后可回收再利用;本发明提供的碳酸镧分离富集核酸的方法操作简便、快速有效、成本低且绿色环保,适用于核酸的大规模批量分离富集,有利于实现核酸分离富集的自动化和机械化;另外,本发明提供的碳酸镧分离富集核酸的用途开辟了碳酸镧的新用途,为碳酸镧在其它领域的理论及实际应用研究奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 碳酸 分离 富集 核酸 方法 用途 | ||
【主权项】:
使用碳酸镧进行核酸分离富集的方法,其特征在于,该方法包括:步骤1),将碳酸镧固体高速剪切处理,制备成粒径为100~500nm的碳酸镧纳米颗粒,所述碳酸镧为La2(CO3)3·xH2O,其中x值为8;步骤2),将待分离富集的核酸样品溶于pH值为5.5~6.0的缓冲溶液一中,所述缓冲溶液一为六次甲基四胺‑盐酸缓冲溶液,所述核酸为DNA,加入步骤1)中所述碳酸镧纳米颗粒,搅拌0.2~2.5小时,离心分离,得到固相部分一,所述固相部分一为碳酸镧纳米颗粒‑核酸复合物;步骤3),将步骤2)中所述固相部分一用蒸馏水清洗后加入到pH值为8.0~8.5的缓冲溶液二中,所述缓冲溶液二为EDTA缓冲溶液,搅拌0.1~1.5小时,离心分离,得到上清液和固相部分二,所述上清液为分离富集后的核酸溶液;步骤4),将步骤3)中所述固相部分二使用pH值为0.3~2.0的稀酸进行淋洗,蒸馏水清洗至中性,离心分离,得到固相部分三,所述固相部分三为回收的碳酸镧纳米颗粒。
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