[发明专利]低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法在审
| 申请号： | 201510489709.7 | 申请日： | 2015-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN105154471A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 张健民;高毅 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学珠江医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人： | 刘延喜;王增鑫 |
| 地址： | 510282 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法，其包括以下步骤：(1)分别制备含有应用于RNA干扰技术的siRNA的重组载体、应用于CRIPRS/Cas9技术的gRNA的重组载体和含有应用于所述CRIPRS/Cas9技术的Cas9的载体；(2)将所述三种载体共同转染至猪体细胞，培养所述经转染的猪体细胞，筛选并鉴定以获得单克隆转基因猪体细胞；(3)利用体细胞核移植技术获得含有所述转基因猪体细胞的核基因的转基因猪；(4)提取所述转基因猪的肝细胞。本发明低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法对PERV基因实现了转录前敲除和转录后抑制，技术方案有效可行。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 perv 肝细胞 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：(1)分别制备含有应用于RNA干扰技术的siRNA的重组载体、应用于CRIPRS/Cas9技术的gRNA的重组载体和含有应用于所述CRIPRS/Cas9技术的Cas9的载体；(2)将所述三种载体共同转染至猪体细胞，培养所述经转染的猪体细胞，筛选并鉴定以获得单克隆转基因猪体细胞；(3)利用体细胞核移植技术获得含有所述转基因猪体细胞的核基因的转基因猪；(4)提取所述转基因猪的肝细胞。
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