[发明专利]基于IgY的检测母牛早孕的胶体金试纸条的制备方法在审
申请号: | 201510493374.6 | 申请日: | 2015-08-12 |
公开(公告)号: | CN105116154A | 公开(公告)日: | 2015-12-02 |
发明(设计)人: | 张小莺;何金鑫;李晓楠 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | G01N33/76 | 分类号: | G01N33/76;G01N33/558 |
代理公司: | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人: | 仲伯煊 |
地址: | 712100 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及基于IgY的检测诊断母牛早孕的胶体金试纸条的制备方法,其包括以下步骤:(1)孕酮半抗原及偶联物的合成;(2)以白蛋白和步骤(1)得到的偶联物做抗原免疫适龄鸡,制备含抗体的免疫蛋,通过免疫蛋提取特异性IgY,并将牛血清白蛋白与孕酮的偶联形成孕酮全抗原,将孕酮全抗原作为检测原监测IgY的特异性;(3)胶体金试纸条的制备。本发明是在结合抗原抗体的免疫学反应和层析原理的基础上实现的,增强了检测孕酮的特异性和灵敏度,显著的缩短了检测时间和减低了检测下限,携带方便,操作简单,成本低廉,能实现现场检测。 | ||
搜索关键词: | 基于 igy 检测 母牛 早孕 胶体 试纸 制备 方法 | ||
【主权项】:
基于IgY的检测诊断母牛早孕的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)孕酮半抗原及偶联物的合成,其中,偶联物包括孕酮和牛血清白蛋白偶联物,孕酮和卵清白蛋白偶联物以及孕酮与过氧化氢偶联物;(2)以白蛋白和步骤(1)得到的偶联物做抗原免疫适龄鸡,制备含抗体的免疫蛋,通过免疫蛋提取特异性IgY,并将牛血清白蛋白与孕酮的偶联形成孕酮全抗原,将孕酮全抗原作为检测原监测IgY的特异性;(3)胶体金试纸条的制备,制备胶体金溶液,并用该胶体金溶液标记纯化好的步骤(2)中的特异性IgY;再将胶体金标记好的抗体吸附于玻璃纤维垫上,冷冻干燥待用;将山羊抗鸡的抗体和孕酮全抗原固定于硝酸纤维素膜上并封闭;最后组装胶体金试纸条。
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