[发明专利]一种芽孢杆菌及其高密度培养方法有效
申请号: | 201510512128.0 | 申请日: | 2015-08-19 |
公开(公告)号: | CN105112326B | 公开(公告)日: | 2019-08-20 |
发明(设计)人: | 刘冬梅;金迅;周全兴;陈舒然 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 宫爱鹏 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种芽孢杆菌及其高密度培养方法,该菌株为芽孢杆菌(Bacillus sp.)13002,保藏编号为CGMCC No.7431。培养方法为:(1)将处于对数期生长的芽孢杆菌13002的菌悬液于种子培养基中,进行活化培养,得到种子培养液;(2)将种子培养液接种于发酵培养基中,进行发酵培养至16h~36h收集发酵培养液;(3)将发酵培养液离心后收集菌泥,用生理盐水清洗,加入菌种保护剂后,混合均匀后,进行干燥,得菌粉。本发明冻干后使其活菌总数达0.730×1011CFU/g以上,较好地克服了培养过程中产酸抑制菌体生长的问题,可较大程度地提高芽孢杆菌13002的生长率。 | ||
搜索关键词: | 一种 芽孢 杆菌 及其 高密度 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将处于对数期生长的芽孢杆菌的菌悬液于种子培养基中,进行活化培养,得到种子培养液;所述种子培养基为:按照质量比计算,细菌学蛋白胨0.2份~1.0份,酵母提取粉0.1份~0.5份,葡萄糖1.0份~2.0份,NaCl 0.5份~1.5份,用蒸馏水定容至100份,调节pH至6.0~7.5,灭菌后冷却即可;(2)以体积比2~10:100的比例,将种子培养液接种于发酵培养基中,当发酵至16h~24h时,补充发酵培养基,进行发酵培养至16h~36h收集发酵培养液;所述发酵培养基为:按照质量比计算,细菌学蛋白胨0.5份~1.75份,酵母提取粉1.0份~2.75份,葡萄糖1.25份~4.0份,NaCl 0.5份~1.5份,用蒸馏水或发酵培养基缓冲液定容至100份,调节pH至6.0~7.5,灭菌后冷却即可;所述发酵培养基缓冲液为Na2HPO4‑柠檬酸、Na2HPO4‑NaH2PO4和KH2PO4‑NaOH缓冲液中的一种或两种,并用其中的一种或两种以上来调节pH;(3)将发酵培养液离心后收集菌泥,用生理盐水清洗后收集菌泥,按保护剂与湿菌泥体积比3~5:1,加入菌种保护剂后,混合均匀后,进行干燥,得菌粉;所述芽孢杆菌为芽孢杆菌(Bacillus sp.)13002,已于2013年4月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC,保藏编号为CGMCC No.7431。
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