[发明专利]血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂

摘要

本发明公开了血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，包括适量防腐剂、稳定剂、色原、高亲和性酶化合物、表面活性剂、牛血清白蛋白，其特征在于所述的高亲和性酶化合物是按照以下方法制备得到1)酶的活化酶的选择、酶的预培养、酶的活化培养、脱水反应；2)制备高亲和性酶化合物化合物选择、混合反应。该试剂能够在各种型号的全自动生化分析仪上对高密度脂蛋白中胆固醇进行检测，无需样本离心、沉淀等繁杂操作，大幅降低了检测工作量，缩短了检测时间，降低了检测成本；并且试剂特异性好、灵敏度高，检测准确率高，与国家推荐的Friedewald公式检测结果比较，相关性达到0.997以上。

主权项

血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定试剂，包括适量防腐剂、稳定剂、色原、高亲和性酶化合物、表面活性剂、牛血清白蛋白，其特征在于：所述的高亲和性酶化合物是按照以下方法制备得到：1)酶的活化：①酶的选择：胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和脂蛋白脂酶，三者按照5～1：1～5：1～1.5的比例混合；②酶的预培养：将上述混合酶置于温度32～39℃、pH值5.5～8的缓冲溶液中预培养3～8小时，其中，所述的缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液或柠檬酸缓冲溶液；③酶的活化培养：经预培养的混合酶转入由牛血清白蛋白、甘油、β‑环糊精、EDTA‑Na溶液、青霉素及无菌水混合液中，在温度34～39℃条件下活化培养5～10小时，得到活化酶混合缓冲液A，其中，所述的混合液组分配比为：牛血清白蛋白50～60％、甘油5～8％、β‑环糊精1～3％、EDTA‑Na溶液1～1.5％、青霉素0.5～0.8％、无菌水34～37％；④脱水反应：采用吸水剂制备过滤柱，将上述活化酶混合缓冲液A缓慢流经过滤柱，除去活化酶混合缓冲液中加入的游离水，并随时调节缓冲液pH值，使其维持在5.5～8；2)制备高亲和性酶化合物①化合物选择：甾类糖苷、三萜烯糖苷、蛋白质毒素和多烯类抗菌素中的一种或多种组合化合物组合，并且化合物采用公知手段进行催化活化，得到活化化合物组合物B；②混合反应：将步骤1)得到的活化酶混合缓冲液A和步骤2)得到的活化化合物组合物B混合，并补充适量的缓冲溶液，在32～39℃条件下混合反应3～10小时，得到高亲和性酶化合物。