[发明专利]视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转换模型及其应用有效
申请号: | 201510519705.9 | 申请日: | 2015-08-21 |
公开(公告)号: | CN105112354B | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 吕立夏;徐国彤 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/10 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 赵志远 |
地址: | 200092 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转换模型及其应用。将ARPE‑19细胞用胰酶消化后,再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中,并在陪替氏培养皿中培养,即得视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转换模型;该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮-间充质转换的分子机制及寻找上皮-间充质转换的干预靶向。与现有技术相比,本发明方法简单易行、重复性好。 | ||
搜索关键词: | 视网膜 色素 上皮细胞 上皮 间充质 转换 模型 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转换模型的应用,其特征在于,该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮-间充质转换的分子机制及寻找上皮-间充质转换的干预靶向;所述视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转换模型的建立方法为:将ARPE‑19细胞用胰酶消化后,再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中,并在陪替氏培养皿中培养;所述应用为:先在细胞皿中将pSTAT3‑TA‑luc报告基因的质粒用lipofectaminer 2000转染到ARPE‑19中,48小时后将细胞转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中在细菌皿中培养,分别于12h、24h、36h、48h、72h后收集细胞样本,蛋白裂解后常规BCA蛋白定量,并用Luciferase检测信号传导和转录激活因子3的表达。
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