[发明专利]一种牛肉中齐帕特罗、西布特罗、克仑普罗和班布特罗促生长剂残留量的测定方法

摘要

本发明公开一种牛肉中齐帕特罗、西布特罗、克仑普罗和班布特罗等促生长剂残留量的测定方法，该方法包括牛肉样品用β‑葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶水解，在pH为1.0±0.2下离心，上清液pH调至9.5±0.2，依次用乙酸乙酯、叔丁基甲醚萃取，合并有机相，吹干，再用甲酸溶解，过阳离子交换固相萃取柱，依次用2%甲酸、水、甲醇淋洗，再用氨化甲醇洗脱，洗脱液吹干，用甲酸甲醇水溶液溶解，膜过滤，滤液上液质联用仪，根据标准曲线得出牛肉中所述促生长剂的残留量。本发明方法可对齐帕特罗、西布特罗、克仑普罗和班布特罗4种促生长剂实现快速检测，监控以上四种药物在牛肉中的残留。

主权项

一种牛肉中齐帕特罗、西布特罗、克仑普罗和班布特罗促生长剂残留量的测定方法，包括如下步骤：（1）样品的提取：取一定量的牛肉样品，绞碎，加入β‑葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶，在pH=5.2下，水解16h，然后用高氯酸调节pH至1.0±0.2，离心；（2）样品的净化：离心得到的上清液pH调节至9.5±0.2，依次用乙酸乙酯、叔丁基甲醚萃取，合并有机相，氮气吹干，再用2%vol甲酸水溶液溶解，得到的溶液过阳离子交换固相萃取柱，依次用2%vol甲酸水溶液、水、甲醇淋洗，抽干，再用氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，用甲酸甲醇水溶液溶解，膜过滤，得滤液；（3）步骤（2）所得的滤液用液质联用仪进行检测，得到所述促生长剂的色谱峰面积，液相色谱条件：C18柱，用0.1%vol甲酸水溶液‑甲醇体系进行梯度洗脱；（4）将所述促生长剂标准品添加到空白样品中，制备成一系列浓度的空白添加试样，按步骤（1）‑（3）处理，得到浓度‑峰面积的标准曲线；（5）根据步骤（3）和步骤（4）的结果即可得出牛肉中所述促生长剂的残留量；步骤（2）所述的甲酸甲醇水溶液为v:v=20:80的0.1%vol甲酸甲醇溶液‑0.1%vol甲酸水溶液；步骤（3）梯度洗脱时，甲醇体积百分比随时间变化如下：0～4min 20%；4～5min 60%；5～6min 80%。