[发明专利]一种SVF的制备方法在审
申请号: | 201510548691.3 | 申请日: | 2015-08-31 |
公开(公告)号: | CN105132500A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
发明(设计)人: | 李青峰;李华;成琴芳 | 申请(专利权)人: | 李青峰 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C12N5/077 |
代理公司: | 上海湾谷知识产权代理事务所(普通合伙) 31289 | 代理人: | 倪继祖 |
地址: | 200011 上海市黄*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种SVF的制备方法,在抽吸的人体脂肪加入胶原酶溶液和生理盐水,在37℃温度下消化30-90分钟,离心去上清,在下层中加入10ml生理盐水重悬,并通过100μm单细胞滤网过滤,去除滤液,留滤渣,并离心洗涤两次即得所述SVF。本发明方法胶原酶用量较低,制备得到的SVF中胶原酶含量非常低,基本可以忽略不计,同时本发明方法制备得到的SVF在细胞活性和增殖活性上也较常规方法制得的SVF要更高。 | ||
搜索关键词: | 一种 svf 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种SVF的制备方法,其特征在于,包括以下具体步骤:步骤1:将抽吸的人体脂肪静置至脂肪和液体分层,去除所述液体,用生理盐水洗涤所述脂肪两次后,将所述脂肪装于无菌离心管中,并加入胶原酶溶液和生理盐水,所述胶原酶溶液与所述脂肪的体积比为1:10;步骤2:将所述无菌离心管倾斜放置于恒温摇床中,37℃温度下消化30‑90分钟,所述恒温摇床的振荡频率每分钟300‑400次以上;步骤3:将所述无菌离心管放入离心机中离心10分钟,离心力为300‑400g,在无菌环境下吸出上层清液,在下层中加入10ml生理盐水重悬,并通过100μm单细胞滤网过滤,去除滤液,滤渣备用;步骤4:将步骤3中的滤渣离心洗涤两次,离心力为600‑700g,每次3‑5分钟,即得所述SVF。
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