[发明专利]一种生物相容性良好的异种脱细胞真皮基质的制备方法有效
| 申请号： | 201510549616.9 | 申请日： | 2015-09-01 |
| 公开（公告）号： | CN105079880B | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 宋灵杰;李一礼;李晶;谢美娜;王云泽;杨国峰 | 申请（专利权）人： | 河北爱能生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36 |
| 代理公司： | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 | 代理人： | 刘磊娜 |
| 地址： | 050000 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及到一种生物相容性良好的异种脱细胞真皮基质的制备方法，其具体包括如下步骤：(1)制备断层皮片；(2)分离表皮和真皮；(3)脱细胞处理；(4)交联；(5)病毒灭活；(6)精制；（7）Co‑60辐照灭菌。本发明提供的方法得到的脱细胞组织工程材料的细胞毒性稳定，细胞相容性更好。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 脱细胞真皮基质 生物相容性 组织工程材料 脱细胞处理 细胞相容性 病毒灭活 断层皮片 分离表皮 辐照灭菌 细胞毒性 脱细胞 真皮 交联 精制 | ||
【主权项】：
一种生物相容性良好的异种脱细胞真皮基质的制备方法，其特征在于，其具体包括如下步骤：(1)制备断层皮片取0.1‑2.0mm厚的动物断层皮片，裁成长、宽、高所需尺寸，PBS液洗涤，0.1%新洁尔灭去脂，再用PBS液洗涤；(2)分离表皮和真皮将步骤(1)得到的断层皮片用质量体积比为g/100ml 的0.1%～0.3%的胰蛋白酶的PBS液在4℃‑20℃下，浸泡6‑36h，依次用乙醇、双氧水和纯水洗涤，最后PBS洗涤；(3)脱细胞处理将步骤(2)处理后的材料先用质量体积比为g/100ml 的0.1～0.5%SDS水溶液洗涤1～6小时，再用水溶性含羟基化合物的水溶液洗涤，然后用纯化水洗涤，最后PBS液洗涤；所述水溶性含羟基化合物包括羧甲基壳聚糖或水溶性醇类，浓度为2~10%，用水溶性含羟基化合物的水溶液洗涤的洗涤时间为1～6小时； (4)交联将步骤(3)处理后的材料用0.024～0.1mol/L的交联液交联，按每片脱细胞动物皮干重对应215ml交联液反应，反应结束后，用0.1mol/L磷酸氢二钠洗涤，再用纯化水洗涤；(5)病毒灭活将步骤(4)处理后的材料用0.2～1.2mol/L氢氧化钠浸泡30～60分钟，纯化水洗涤至中性；(6)精制将步骤(5)处理后的材料用乙醇洗涤，再用纯化水充分洗涤；（7）Co‑60辐照灭菌将步骤(6)处理后的材料密封在生理盐水中，经Co‑60所产生的γ射线辐照消毒灭菌，即得成品。
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