[发明专利]黄绿蜜环菌中染料木素单体化合物的提取方法及其应用

摘要

本发明提供一种黄绿蜜环菌中染料木素单体化合物的提取方法以黄绿蜜环菌子实体为原料，磨成粉末后乙酸乙酯提取，浓缩至膏状；用正己烷‑乙醇溶剂溶；一维液相色谱分离采用Silica色谱柱，A相正己烷、B相乙醇二元流动相，B相浓度由0％至75％梯度洗脱，收集26‑29min洗脱液；用乙醇‑正己烷溶剂溶解；二维液相色谱分离采用Silica色谱柱，A相正己烷、B相乙醇二元流动相，B相浓度2％等度洗脱，收集8‑11min洗脱液，蒸发浓缩，得染料木素。该分离方法稳定，重复性高，制备量大，操作简单省时，成本低，染料木素提取率高；目的物对肺癌A549细胞和肝癌Hep‑G2细胞具有抑制作用，具有抗癌药物开发潜力。

主权项

一种黄绿蜜环菌中染料木素单体化合物的提取方法，其特征在于包括以下步骤：(1)以黄绿蜜环菌子实体为原料，经干燥并磨成粉末状后，用乙酸乙酯以液固比(5‑10)mL︰1g进行浸泡，然后过滤取上清，得到乙酸乙酯提取液，并浓缩至膏状；(2)使用乙醇体积分数为10‑35％的正己烷‑乙醇二元混合溶剂溶解步骤(1)得到的膏状乙酸乙酯提取物，得到100‑150mg/mL的上样溶液；(3)对上样溶液进行一维液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷、B相为乙醇，进样量为50‑150mL/针，流动相流速为550‑600mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长210‑260nm；采用的洗脱方式为B相浓度由0％至75％进行梯度洗脱45‑50min，根据紫外吸收光谱收集26‑29min洗脱液作为目的组分，减压浓缩至膏状，得到一维液相组分；(4)用乙醇体积分数为2‑15％的乙醇‑正己烷二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为50‑100mg/mL；(5)进行二维液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷、B相为乙醇，进样量为500‑2000μL/针，流动相流速为10‑30mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长210‑260nm，采用的洗脱方式为B相浓度2％进行等度洗脱15‑20min，根据紫外吸收光谱收集8‑11min洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到染料木素单体化合物。