[发明专利]一种真皮组织仿生海绵的制备方法

摘要

本发明公开了一种真皮组织仿生海绵的制备方法，该真皮组织仿生海绵中丝蛋白的质量分数为10％～95％，胶原蛋白的质量分数为5％～90％，将丝蛋白溶液与胶原蛋白溶液混合后，经过水蒸气蒸发成膜，然后经过1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺混合水溶液浸泡，干燥等过程制得所述真皮组织仿生海绵。本发明真皮组织仿生海绵具有在微结构、力学性质和分子结构方面对真皮组织的仿生性能，有利于提高其抑制瘢痕形成和促进功能性真皮组织再生的性能，从而为解决病理性瘢痕的难题提供新方法。

主权项

一种真皮组织仿生海绵的制备方法，其特征在于所述真皮组织仿生海绵所含原料的质量百分数为：丝蛋白10％～95％，胶原蛋白5％～90％；具体制备步骤为：(1)将蚕茧置于Na₂CO₃水溶液中沸煮30min，然后用去离子水润洗3次，制得蚕丝素纤维；然后将蚕丝素纤维置于溴化锂溶液中，37℃条件下溶解，制得丝蛋白溴化锂溶液；最后将所得溶液在截留分子量为3500Da的透析盒中透析3天后，得丝蛋白溶液，调节溶液质量百分浓度为5％；(2)将步骤(1)制得的丝蛋白溶液与质量百分浓度为1.5％的胶原蛋白溶液在37℃条件下按体积比0.4～57:10混合，在速度为50rpm的漩涡振荡器上振荡5min，至混合均匀，然后在离心力为1500g下离心3min，除去溶液中的气泡；(3)将步骤(2)离心后的混合液转移至聚四氟乙烯槽中，溶液的厚度为2mm，然后将此槽放置于37℃、吸风风速为0.3米/秒的通风橱中央，放置时间为24h，形成丝蛋白/胶原蛋白高分子膜；(4)将丝蛋白/胶原蛋白高分子膜浸没于1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺混合水溶液中，40℃下放置8h；将所得高分子膜在300ml去离子水中浸泡30min，此步骤重复3次，最后将所得高分子膜在300ml液氮溶液中冷冻10min；(5)将冷冻的高分子膜在真空冷冻干燥机中冷冻干燥，真空冷冻干燥条件为：冷阱温度‑55℃、真空度3～5Pa，时间18h，制得丝蛋白/胶原蛋白复合材料，即所述真皮组织仿生海绵；步骤(4)中所述1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺混合水溶液中1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺与N‑羟基琥珀酰亚胺的浓度比为1:1，均为0.02M；所述混合水溶液的pH值为4.5；步骤(1)中所述Na₂CO₃水溶液浓度为0.01～1M；所述溴化锂溶液的浓度为1～20M。