[发明专利]一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法有效
| 申请号： | 201510559851.4 | 申请日： | 2015-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN105181778B | 公开（公告）日： | 2017-12-05 |
| 发明（设计）人： | 王建浩;秦玉琴;滕一万;陈瑶;李进晨;蒋鹏举;邱琳;王车礼;杨丽;张晨澄;樊杰;柳丽 | 申请（专利权）人： | 常州大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 213164 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物分析技术领域，一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法，步骤如下(1)设计3’端偶联荧光染料的DNA，形成荧光探针；(2)设计若干与步骤(1)所述DNA片段具有不同数量不匹配碱基的互补DNA；(3)分别将若干互补DNA与荧光探针在毛细管内杂交，经荧光检测，计算峰面积比(S1/STotal)，得到峰面积比与不匹配碱基数的标准曲线，待测样品与荧光探针毛细管内杂交后，计算其电泳峰面积比，对照标准曲线确定待测样品的不匹配碱基数。本发明提供的毛细管内快速检测不匹配碱基数的方法，操作简单，可重复性高，能方便快捷的检测出样品中不匹配碱基数量，进一步拓展了DNA荧光探针在生物分析领域的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 毛细管 电泳 快速 检测 碱基 匹配 数量 方法 | ||
【主权项】：
一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法，其特征在于：(1)设计3’端偶联荧光染料的DNA，形成荧光探针，所述的荧光染料为6‑FAM，所述荧光探针中DNA为5’‑GGT TGG TGT GGT TGG‑3’；(2)设计若干与步骤(1)所述DNA片段具有不同数量不匹配碱基的互补DNA；(3)分别将若干互补DNA与荧光探针在毛细管内杂交，经荧光检测，计算峰面积比S1/STotal，其中，S1为荧光探针峰面积，STotal为所有峰面积，得到峰面积比与不匹配碱基数的标准曲线，待测样品与荧光探针毛细管内杂交后，计算其电泳峰面积比S1/STotal，对照标准曲线确定待测样品的不匹配碱基数。
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