[发明专利]一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其制备方法在审
申请号: | 201510568131.4 | 申请日: | 2015-09-08 |
公开(公告)号: | CN105126096A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
发明(设计)人: | 张澍;吕宏亮 | 申请(专利权)人: | 吕宏亮;张澍 |
主分类号: | A61K39/135 | 分类号: | A61K39/135;C12N15/85;A61K9/16;A61P31/14 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;韩小雷 |
地址: | 北京市朝阳区管庄双*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其制备方法。本发明首先通过表达P12A(3个氨基酸位点突变,VP1K210E、VP1E83K、VP1C134S)和无血清悬浮培养,建立类似自然的75S FMDV病毒样颗粒(VLP)标准,并提高了病毒样颗粒的产量。本发明进一步提供了一种无血清悬浮培养、高pH驯化昆虫细胞,该昆虫细胞可稳定、高效生产FMDV VLP,生产的VLP大小和结构类似标准BHK-21上生产的VLP,产量高出母本细胞Sf21的11倍。VLP制备疫苗免疫动物产生IgG抗体反应。IgG抗体滴度、口蹄疫病毒中和抗体滴度和BHK-21制备的VLP疫苗免疫所产生的无显著差异。这表明这种高pH适应昆虫细胞可用于FMDV VLP的疫苗生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 口蹄疫病毒 颗粒 疫苗 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗,其特征在于,通过以下方法制备得到:将口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P12A cDNA序列克隆到真核表达载体中,所得的重组质粒转染哺乳动物细胞,使其表达口蹄疫病毒衣壳蛋白并组装成口蹄疫病毒样颗粒,纯化、乳化,即得;其中,所述的衣壳前体蛋白P12A的结构蛋白VP1在原始口蹄疫病毒VP1蛋白基因的基础上进行了以下位点的突变:Glu83→Lys,Ser134→Cys,P12A连接处Lys210→Glu。
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