[发明专利]核酸的检测方法在审
申请号: | 201510578997.3 | 申请日: | 2015-09-11 |
公开(公告)号: | CN105177110A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
发明(设计)人: | 娄春波;欧阳颀;张益豪;魏伟佳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所;北京大学 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44;C12Q1/66;C12Q1/26;C12Q1/25;C12Q1/48;G01N21/64 |
代理公司: | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人: | 洪俊梅;张淑珍 |
地址: | 100101 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及利用拆分式信号发生蛋白与核酸酶缺陷型Cas9蛋白的融合蛋白对样品中是否存在目标核酸进行检测的体外方法、试剂盒和设备。 | ||
搜索关键词: | 核酸 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种对样品中是否存在目标核酸进行检测的方法,所述目标核酸为目标DNA,所述方法包含如下步骤:(1)提供第一融合蛋白和第二融合蛋白,其中,所述第一融合蛋白为拆分式信号发生蛋白N端片段与核酸酶缺陷型Cas9蛋白的融合蛋白,所述第二融合蛋白为拆分式信号发生蛋白C端片段与核酸酶缺陷型Cas9蛋白的融合蛋白,由所述N端片段和所述C端片段构成的所述信号发生蛋白能够参与产生可检测信号的化学反应;(2)针对所述目标DNA中的一对或多对的靶序列,设计并合成sgRNA对;(3)将所述样品、步骤(1)提供的所述第一融合蛋白和所述第二融合蛋白、步骤(2)获得的各sgRNA对以及参与产生可检测信号的化学反应的其它反应物和/或催化剂共同孵育,生成可检测信号;以及(4)对所述可检测信号进行测量。
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