[发明专利]消除引物二聚体的零背景解旋酶依赖体系及扩增方法和应用有效
| 申请号： | 201510579700.5 | 申请日： | 2015-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN105176974B | 公开（公告）日： | 2018-02-27 |
| 发明（设计）人： | 赵永席;陈锋 | 申请（专利权）人： | 西安交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/686;C12Q1/48 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司61200 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 710049 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种消除引物二聚体的零背景解旋酶依赖体系及扩增方法和应用，属于分子生物学及分子诊断技术领域。本发明针对HDA体系中引物二聚体造成的假阳性信号，通过使用适当低浓度的ATP和dNTPs来消除体系中的引物二聚体，得到简单而通用的零背景HDA检测方法。此方法无需增加额外的加热灭活步骤或者额外的酶，也无需精心设计的结构特殊的引物，只需要适当降低原体系中ATP和dNTPs的浓度即可完全消除引物二聚体引起的假阳性背景，具有简单方便，通用性强，效果好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 消除 引物 二聚体 背景 解旋酶 依赖 体系 扩增 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种消除引物二聚体的零背景解旋酶依赖体系，其特征在于，该体系包括：2.5μL的10×退火缓冲液II，1μL的100mM MgSO4、2μL的500mM NaCl、1μL的5μM反向引物、1μL的5μM正向引物、1μL的52.5mM ATP溶液、1μL的3.5mM dNTPs、0.75μL的酶混合物及1μL的5×SYBR Green I。
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