[发明专利]富钙水稻快速筛选方法在审
申请号: | 201510580164.0 | 申请日: | 2015-09-13 |
公开(公告)号: | CN105223191A | 公开(公告)日: | 2016-01-06 |
发明(设计)人: | 石春海;张世玺;金哓丽 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种富钙水稻快速筛选方法,包括如下步骤:对待测水稻糙米和标准品水稻糙米分别进行如下步骤:糙米糊化,在糊化物中加入盐酸进行中和,再加入三乙醇胺溶液、8-羟基喹啉-5-磺酸、pH=8的Tris-HCl缓冲溶液、偶氮胂Ⅲ染色液,定容,振荡摇匀后静止;取上层清液,从而分别得到待测水稻的糙米反应物和标准品水稻的糙米反应物;当待测水稻糙米反应物的颜色深于标准品水稻的糙米反应物颜色时,则说明待测水稻糙米含钙量高于标准品水稻,颜色越深则钙含量越高;反之,当待测水稻糙米反应物的颜色浅于标准品水稻的糙米反应物颜色时,则说明待测水稻糙米含钙量低于标准品水稻,颜色越浅则钙含量越低。 | ||
搜索关键词: | 水稻 快速 筛选 方法 | ||
【主权项】:
富钙水稻快速筛选方法,其特征是包括如下步骤:对待测水稻糙米和标准品水稻糙米分别进行如下步骤1)~4);1)糙米糊化:取用水稻糙米8粒,加入质量浓度为4%NaOH溶液0.8~1.2mL,在恒温培养箱中于34.5~35.5℃糊化5.5~6.5h,取出后于振荡器上振荡1.5~2.5min,振荡频率为300~350r/min;2)在步骤1)的所得物中加入0.4~0.6mL浓度为2M的盐酸进行中和;3)在步骤2)的所得物中加入质量浓度为20%的三乙醇胺溶液0.4~0.6mL、10mmol/L的8‑羟基喹啉‑5‑磺酸0.9~1.1mL、pH=8的Tris‑HCl缓冲溶液1.4~1.6mL;4)在步骤3)的所得物中加入1.6~2.0mL质量浓度为0.06%的偶氮胂Ⅲ染色液,定容到15mL,振荡摇匀后静止8~12min;取上层清液,从而分别得到待测水稻的糙米反应物和标准品水稻的糙米反应物;所述质量浓度为0.06%的偶氮胂Ⅲ染色液用质量浓度5%的碳酸钠溶液配制而成;5)将步骤4)所得待测水稻的糙米反应物和标准品水稻的糙米反应物进行颜色比较;当待测水稻糙米反应物的颜色深于标准品水稻的糙米反应物颜色时,则说明待测水稻糙米含钙量高于标准品水稻,颜色越深则钙含量越高;反之,当待测水稻糙米反应物的颜色浅于标准品水稻的糙米反应物颜色时,则说明待测水稻糙米含钙量低于标准品水稻,颜色越浅则钙含量越低。
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