[发明专利]一种藻体中腐殖酸的分级提取方法

摘要

本发明公开了一种藻体中腐殖酸的分级提取方法，所述分级提取方法包括如下步骤藻体预处理、藻体索氏提取、藻体氯化钙及酸洗、藻体碳酸钠处理、藻体碱液提取、藻体腐殖酸除硅、藻体腐殖酸除富里酸、藻体腐殖酸除盐及固化。通过上述方式，本发明能够从藻体中提取腐殖酸，并利用XAD‑8树脂分离技术进行亚组分分离，最终得到分级的藻体腐殖酸亚组分。

主权项

一种藻体中腐殖酸的分级提取方法，其特征在于，所述分级提取方法包括如下步骤：步骤a、藻体预处理：取风干后的藻体剔除杂物，烘干碾磨后过筛，得到藻体粉末；步骤b、藻体索氏提取：将藻体粉末置于索式提取器中，依次用乙醚、丙酮、95%乙醇、二氧杂环己烷和去离子水为提取液进行索氏提取，所得固体标记为索提藻体；步骤c、藻体氯化钙及酸洗：用氯化钙溶液连续三次提取索提藻体，每次提取时固液比为1：10，在40‑60oC条件下连续搅拌15‑30 min后，离心所得固体标记为氯化钙处理藻体；用盐酸连续三次提取氯化钙处理藻体，每次提取时固液比为1：10，连续搅拌10‑30 min后，离心所得固体标记为盐酸处理藻体；向盐酸处理藻体中加入去离子水，使固液比达到1：10，连续搅拌10‑30 min后，离心所得固体标记为水洗盐酸处理藻体；步骤d、藻体碳酸钠处理：用碳酸钠溶液连续三次提取水洗盐酸处理藻体，每次提取固液比为1：10，在30‑45oC条件下连续搅拌30‑60 min后，离心所得固体标记为碳酸钠处理藻体；向碳酸钠处理藻体中加入去离子水，使固液比达到1：10，连续搅拌10 ‑30 min后，离心所得固体标记为水洗碳酸钠处理藻体；步骤e、藻体碱液提取：向水洗碳酸钠处理藻体中加入去离子水，使溶液固液比达到1:3，用盐酸和氢氧化钠调节溶液pH值=6.0‑8.0，在氮气保护下，向溶液中加入焦磷酸钠溶液，使溶液固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液1及固体焦磷酸钠提取藻体1；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体1中加入焦磷酸钠溶液，使溶液固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液2及固体焦磷酸钠提取藻体2；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体2中加入焦磷酸钠溶液，使溶液固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液3及固体焦磷酸钠提取藻体3；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体3中加入去离子水，使溶液固液比达到1:5，用盐酸和氢氧化钠调节溶液pH值=6.0‑8.0，向溶液中加入氢氧化钠溶液，使溶液固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液4及固体氢氧化钠提取藻体1；在氮气保护下，向氢氧化钠提取藻体1中加入氢氧化钠溶液，使溶液固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液5及固体氢氧化钠提取藻体2；在氮气保护下，向氢氧化钠提取藻体2中加入氢氧化钠溶液，使溶液固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液6及固体氢氧化钠提取藻体3；步骤f、藻体腐殖酸除硅：用盐酸将步骤e中上层清液1‑上层清液6进行酸化，分别调节每份溶液pH值=1.0，再分别向其中加入氢氟酸，使每份酸化液中的氢氟酸浓度为0.3 mol/L，再分别搅拌4‑6 h，分别静置20‑28h，离心所得固体标记为无硅腐殖酸亚组分溶液1‑无硅腐殖酸亚组分溶液6，共计六份无硅腐殖酸亚组分溶液；步骤g、藻体腐殖酸除富里酸：向六份无硅腐殖酸亚组分溶液中分别加入0.1mol/L 盐酸溶液，使溶液固液比均为1:10，持续搅拌4‑6h，并静置20‑28h后，再将每份溶液离心分离得到富里酸溶液及对应的固态纯化腐殖酸亚组分；其中，由无硅腐殖酸亚组分溶液1得到离心分离的富里酸溶液1及对应的固态纯化腐殖酸亚组分1；无硅腐殖酸亚组分溶液2得到离心分离的富里酸溶液2及对应的固态纯化腐殖酸亚组分2；无硅腐殖酸亚组分溶液3得到离心分离的富里酸溶液3及对应的固态纯化腐殖酸亚组分3；无硅腐殖酸亚组分溶液4得到离心分离的富里酸溶液4及对应的固态纯化腐殖酸亚组分4；无硅腐殖酸亚组分溶液5得到离心分离的富里酸溶液5及对应的固态纯化腐殖酸亚组分5；无硅腐殖酸亚组分溶液6得到离心分离的富里酸溶液6及对应的固态纯化腐殖酸亚组分6；步骤h、藻体腐殖酸除盐及固化：在氮气保护下，用氢氧化钠分别溶解固态纯化腐殖酸亚组分1至固态纯化腐殖酸亚组分6，用盐酸调节每份溶解液至pH=5‑9，使每份溶解液的固液比均为1:2，共计得到六份腐殖酸亚组分溶液；将六份腐殖酸亚组分溶液分别置入六个7000道尔顿透析袋，并将每个透析袋置于超纯水中，组成透析体系，每个透析体系均搅拌10‑24 h；再将每个透析袋中的腐殖酸亚组分溶液冷冻干燥，分别得到六份腐殖酸亚组分固体，分别命名为藻体腐殖酸亚组分1、藻体腐殖酸亚组分2、藻体腐殖酸亚组分3、藻体腐殖酸亚组分4、藻体腐殖酸亚组分5、藻体腐殖酸亚组分6。