[发明专利]甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D‑二聚体抗体时猝灭现象中的应用有效

专利信息
申请号: 201510589059.3 申请日: 2015-09-16
公开(公告)号: CN105203772B 公开(公告)日: 2017-05-24
发明(设计)人: 陆晨;张闻;王建飞;周海滨 申请(专利权)人: 宁波瑞源生物科技有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/542
代理公司: 宁波市鄞州盛飞专利代理事务所(普通合伙)33243 代理人: 张向飞
地址: 315000 浙江省宁*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及一种甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D‑二聚体抗体时猝灭现象中的应用。该应用为利用甘氨酸通过共价键或离子键结合抗体标记时残留的多余荧光素FITC,减少超滤次数,减弱猝灭现象,提高荧光素‑抗体纯度和荧光检测信号。所述的应用步骤如下先将荧光素FITC用DMF溶解至0.5‑2mg/mL,得到所需荧光素FITC的浓度;将D‑二聚体抗体和荧光素FITC分别用PBS溶液稀释;将稀释后的荧光素FITC和D‑二聚体抗体混匀,添加甘氨酸至最终甘氨酸的浓度为1‑5mmol/L,然后在30‑40℃下混匀1‑2小时;经过超滤、离心,最后用D‑二聚体抗体稀释液定容。本发明添加甘氨酸可以有效减弱荧光素FITC标记D‑二聚体抗体时的猝灭现象,且应用的方法简单可行。
搜索关键词: 甘氨酸 减弱 荧光 fitc 标记 二聚体 抗体 时猝灭 现象 中的 应用
【主权项】:
甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D‑二聚体抗体时淬灭现象中的应用,其特征在于,甘氨酸通过共价键或离子键结合抗体标记时残留的多余荧光素FITC,减少超滤次数,减弱淬灭现象,提高荧光素‑抗体纯度和荧光检测信号;所述的应用步骤如下:先将荧光素用DMF溶解至0.5‑2mg/mL得荧光素FITC;将D‑二聚体抗体和荧光素FITC分别用PBS溶液稀释;将稀释后的荧光素FITC和D‑二聚体抗体混匀,添加甘氨酸至最终甘氨酸的浓度为1‑5mmol/L,然后在30‑40℃下混匀1‑2小时;经过超滤、离心,最后用D‑二聚体抗体稀释液定容;所述D‑二聚体抗体稀释液的组分为:1‑2%酪蛋白,0.1‑0.3%叠氮化钠,1‑3%表面活性剂,10‑20mM PBS。
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