[发明专利]一种VOCs增溶菌的开放式发酵培养方法和装置

摘要

本发明公开了一种VOCs增溶菌的开放式发酵培养方法和装置。首先将含有VOCs增溶菌的样品在无菌条件下摇床驯化得到驯化种液；再在无菌条件下转接驯化种液进行连续曝气培养，培养容器用若干层透气的过滤材料封口；按照相同的方法进行多次转接培养，每次转接，对容器进行封口的过滤材料减少一层；待发酵体系逐渐稳定后，转接条件由无菌条件变为自然条件；当过滤材料完全减掉时，发酵培养基也不再灭菌，实现完全开放式自然培养。直接用本发明的增溶菌完全开放式的自然发酵体系和装置得到的发酵液对VOC等进行增溶，增溶效果优异，可大幅降低生产成本，易实现大规模工程生产应用，为BST的大批量生产提供技术支持，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种VOCs增溶菌的开放式发酵培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.无菌驯化培养：无菌条件下，按2～5v/v%的接种量，将含有VOCs增溶菌的样品接种到灭菌的发酵培养基，28～32℃、170～200rpm驯化培养36～48h，得到驯化种液；S2.无菌培养：按照容器容积的50～60%计，在容器中加入发酵培养基，用若干层透气的过滤材料封口后灭菌，按照 2～5 v/v %的接种量，无菌条件下转接驯化种液，28～32℃条件下连续曝气培养；S3.转接培养：按照步骤S2相同的方法，进行多次转接培养；每次转接，对容器进行封口的过滤材料减少一层；S4.半开放培养：当发酵体系稳定后，由无菌接种变为自然接种，即转接无需在无菌条件下进行，其他方法和条件同步骤S2，继续进行转接培养；每次转接，对容器进行封口的过滤材料减少一层；S5.完全开放式自然培养：当过滤材料完全减掉时，发酵培养基也不再灭菌，实现完全开放式自然培养；其中，所述发酵培养基的配方为：硫酸铵5 g/L，废石油20 g/L，葡萄糖1.0g/L，氯化钾1.0 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，pH7～7.5，自来水定容；步骤S4所述发酵体系稳定是指稳定产生表面活性剂。