[发明专利]一种提高大樱桃花粉萌发率的方法

摘要

本发明公开了一种提高大樱桃花粉萌发率的方法，包括花粉的采集、保存及花粉活力测定。解决了大樱桃花粉的收集、贮藏和萌发等技术难题，使用本发明提供的大樱桃花粉萌发固体培养基，以蒸馏水为溶剂，包含组分有0.5％琼脂、10％蔗糖、1mg·L^-1吲哚乙酸、0.3％硼酸、30g·L^-1聚乙二醇、10mg·L^-1维生素Vc，pH为6.5，25℃光暗交替条件下培养，大樱桃花粉萌发率可达到85.3％，花粉管也能得到较好生长。花粉萌发时间短、萌发率高，具有较好的应用前景。

主权项

一种提高大樱桃花粉萌发率的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)花粉的采集：4月初采集含苞待放的铃铛花带回室内，用软毛牙刷刷下花药，置于光滑纸面，用50目铁筛除去花丝，把鲜花药均匀地铺在60cm×45cm的白纸上，置于20‑25℃干燥培养箱中干燥散粉，每两小时翻动一次，24h后，花药开裂散出花粉，然后，把花药倒入100目细箩筛，把花粉筛入铝盆中，最后用毛刷将白纸上以及细箩筛上的花粉也轻轻刷入盆中；(2)花药的保存：将筛出的花粉用硫酸纸小袋包好标记后放入塑料盒子中，再添加1.5‑2倍的变色硅胶干燥剂，花粉要分散埋在变色硅胶中，然后密封，放入‑18℃冰柜里贮藏备用；(3)固体培养基的制备：在500mL的烧杯中加入100mL蒸馏水，再加入琼脂，在微波炉中加热，使之完全熔解，然后加入蔗糖，再加入少量硼酸，在其中加入微量聚乙二醇、维生素以形成花粉粒发芽的最适环境条件，促进花粉的萌发，等到溶液冷却后，调节pH值6.5，在熬制培养基时，应在烧杯上的液面处用计号笔沿液面划线标记；当液面在熬制过程中因水分蒸发下降时，应及时添加蒸馏水，以保持培养基的标准浓度，并将熬制好的培养基溶液连烧杯放入盛有35℃热水的容器中，防止冷却凝固，以备随后使用；(4)器皿消毒：发芽实验时所用的实验用品都要经过酒精消毒处理后备用，使用时要减少和手指接触的面积，以减少污染；(5)花粉的播种与培养：用滴管吸取培养基溶液，滴一滴于载玻片的中央，当凝固后再进行花粉的播种；播花粉时，用经酒精消毒过的头发丝蘸取花粉，在培养基的表面轻轻震动；播好后将载玻片放置于培养皿中，要事先在培养皿内放好滤纸或棉垫并加水保湿；每种花粉做3个载玻片；而后在培养皿上用玻璃铅笔标号，并进行记录，记录内容包括花粉种类、采粉时间，播种时间；用湿纱布覆盖后加盖，放于光照培养箱内培养；花粉培养15min～25min后部分花粉开始萌发，花粉萌发后花粉管长度超过花粉粒直径，花粉管开始快速生长；(6)花粉的活力测定：培养3.5h～4h后，以花粉管长度大于花粉粒直径为花粉萌发标准，每处理重复3次，每重复随机观察3～5个视野，每视野观察花粉数30～80粒，统计花粉萌发率。