[发明专利]一种具有抗乳腺癌活性的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及具有抗乳腺癌活性的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及其应用，可有效解决制备具有抗乳腺癌活性的异戊烯基化黄酮类化合物，实现制备抗乳腺癌药物的问题，方法是，小叶莲用乙醇提取，回收乙醇，混悬蒸馏水中，用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将乙酸乙酯萃取部位用石油醚‑丙酮梯度洗脱，流份合并得到组份Fr.1‑Fr.16，组份Fr.4甲醇洗脱，得到的亚组份Fr.4‑1用甲醇‑水洗脱，得桃儿七酮O；组份Fr.5甲醇洗脱，得到的亚组份Fr.5‑1用甲醇‑水洗脱，得桃儿七酮 J、桃儿七酮 K、桃儿七酮 M、桃儿七酮 N；组份Fr.6甲醇洗脱，得到的亚组份Fr.6‑1用甲醇‑水洗脱，得到的亚组份Fr.6‑1‑2甲醇‑水洗脱，得桃儿七酮 L，本发明具有抗乳腺癌活性，用于制备抗乳腺癌药物。

主权项

一种具有抗乳腺癌活性的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，该类化合物是从小叶莲中分离得到的桃儿七酮J、桃儿七酮K、桃儿七酮L、桃儿七酮M、桃儿七酮N、桃儿七酮O，分子结构式分别为：制备方法是：以小叶莲6–9kg为原料，以2–5倍原料重量、体积比为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，每次提取时间为1.5–2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2–3.2L，时间为1.5–2小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚‑丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.1–13L洗脱液，流速为10–15mLmin‑1，每350–500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚‑丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷‑甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸‑乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到Fr.1‑Fr.16个组份；将组份Fr.4经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5–10mL为一流份，收集27个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比6︰1的二氯甲烷‑丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸‑乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5–18、流份19–27，得到2个亚组份Fr.4‑1，Fr.4‑2，将亚组份Fr.4‑1经开放ODS柱色谱，用体积比70︰30的甲醇‑水作洗脱液进行洗脱，收集洗脱液，得桃儿七酮O；将组份Fr.5经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5–10mL为一流份，收集36个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比5︰1的二氯甲烷‑丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸‑乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份4–16、流份17–28、流份29–36，得到3个亚组份Fr.5‑1，Fr.5‑2，Fr.5‑3，将亚组份Fr.5‑1经高效液相色谱，用体积比80︰20的甲醇‑水作洗脱液进行洗脱，收集洗脱时间为21min的峰得到桃儿七酮J、收集洗脱时间为25min的峰得到桃儿七酮K、收集洗脱时间为33min的峰得到桃儿七酮M，收集洗脱时间为36min的峰得到桃儿七酮N；将组份Fr.6经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5–10mL为一流份，收集38个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比4︰1的二氯甲烷‑丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸‑乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份6–18、流份19–32、33–38流份，得到3个亚组份Fr.6‑1，Fr.6‑2，Fr.6‑3，亚组份Fr.6‑1经过开放ODS柱色谱，体积比20:80‑80:20的甲醇‑水作为洗脱液进行梯度洗脱，分别收集体积比50:50、60:40、70:30的甲醇‑水洗脱液，得亚组份Fr.6‑1‑1，Fr.6‑1‑2，Fr.6‑1‑3，将亚组份Fr.6‑1‑2经高效液相色谱，用体积比80︰20的甲醇‑水作洗脱液进行洗脱，收集洗脱时间为31min的峰得到桃儿七酮L。