[发明专利]用于IgA肾病快速识别和早期诊断的变色传感器制备方法

摘要

本发明公开了一种用于IgA肾病快速识别和早期诊断的变色生物传感器制备方法，首先应用薄膜法或注入法得到稳定的类丁二炔囊泡分散体；然后将探针凝集素溶解在pH值为6‑8的缓冲液中，按凝集素与类丁二炔囊泡摩尔比1:1‑1:5的比例，加入到类丁二炔囊泡分散体中；最后在4‑37℃条件下，溶液中的凝集素通过物理吸附或化学偶联方式修饰类丁二炔囊泡表面，获得对血清中具有异常O‑型糖基化的IgA1标志物的核心片断‑‑‑‑N‑乙酰半乳糖胺，具有特异性识别功能的工具。本发明操作简便、快速、准确、经济，且价格远低于同类产品，有利于IgA肾病快速识别、早期诊断和普查的推广使用。

主权项

1.一种用于IgA肾病快速识别和早期诊断的变色生物传感器制备方法，其特征在于，所述用于IgA肾病快速识别和早期诊断的变色传感器制备方法包括以下步骤：首先应用薄膜法或注入法得到类丁二炔囊泡分散体；然后将探针凝集素溶解于pH为6‑8的缓冲液中，按凝集素与丁二炔囊泡的摩尔比1:1‑1:5的比例，加入到丁二炔囊泡分散体中；最后在4‑37℃条件下，分散液中的凝集素与丁二炔囊泡通过物理吸附或化学偶联修饰，得到对IgA肾病患者血清中具有异常O‑型糖基化的IgA1标志物的核心糖片断N‑乙酰半乳糖胺具有特异性识别功能的诊断工具；所述丁二炔的类化合物为10,12‑二十七碳二炔酸、10,12‑二十九碳二炔酸、5,7‑十六碳二炔酸、10,12‑二十五碳二炔酸、10,12‑二十三碳二炔酸、10,12‑二十五二炔‑1‑醇、10,12‑二十五烷二炔酸甲酯、2,4‑十五碳二炔酸、2,4‑十七碳二炔酸、2,4‑十九碳二炔酸、2,4‑二十一碳二炔酸中的任意一种；所述凝集素为蚕豆凝集素、蜗牛凝集素、刀豆素A、花生凝集素和大豆凝集素、昆虫血淋巴凝集素中的任意一种；所述缓冲溶液磷酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐、硼酸盐、巴比妥酸、三羟甲基氨基甲烷碱、醋酸盐缓冲液中的任意一种；所述浓度为0.02‑1％的化学偶联剂为碳二亚胺、戊二醛、京尼平、谷氨酰胺转胺酶中的任意一种；所述用于IgA肾病快速识别和早期诊断的变色传感器的使用方法包括：在室温下，将1‑25μg/ml异常O‑型糖基化的IgA1标志物的核心片断‑‑‑‑N‑乙酰半乳糖胺，作为对照样品加入到识别和诊断工具中，观察分散液的可见光范围颜色变化；颜色的变化随着N‑乙酰半乳糖胺浓度不同而变色，由蓝色至红色，根据肉眼观察进行定性的判定，利用紫外‑可见光谱仪进行半定量分析；血清待检测样品中同样操作。