[发明专利]一种半定量可视化酶联免疫分析方法有效
申请号: | 201510604707.8 | 申请日: | 2015-09-22 |
公开(公告)号: | CN105223347B | 公开(公告)日: | 2017-03-08 |
发明(设计)人: | 郭隆华;许梢华;马小明;林振宇;邱彬;陈国南 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N21/78 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 发明公开了一种半定量可视化酶联免疫分析新方法,包括以下步骤(1)显色纳米金的制备(2)酶联免疫吸附及显色反应。本发明原料易得,成本低,无需任何复杂检测设备,通过肉眼即可判断检测结果,并且方法操作简单,重现性、稳定性好,能够直接用于半定量快速检测各种临床标志蛋白,有望在生命科学及医学临床检测等领域得到广泛应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 定量 可视化 免疫 分析 方法 | ||
【主权项】:
一种半定量可视化酶联免疫分析方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:(1)显色纳米金的制备:首先根据柠檬酸钠还原法合成纳米金,其粒径为15±5 nm;然后根据金种生长法,合成十六烷基三甲基溴化铵包裹的纳米金,其粒径为45±15 nm;(2)可视化检测蛋白抗原:首先根据经典ELISA法,捕获抗体—抗原—检测抗体发生特异性反应,然后将链霉亲和素化的辣根过氧化物酶与生物素化的检测抗体相结合,从而将辣根过氧化物酶链接在抗体上;加入相应的TMB显色剂后,反应30min,加入盐酸终止酶促反应;同时生成了黄色的TMB2+;此时加入步骤(1)制备好的十六烷基三甲基溴化铵包裹的纳米金,TMB2+就会与纳米金发生反应,从而将原来单一的黄色变化转变为红-黄双色变化,通过目测溶液颜色的变化可以对目标抗原进行半定量分析。
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