[发明专利]适用茶叶中吡虫啉等3种农药多残留速测法及所用试纸条

摘要

本发明公开了一种适用于茶叶中吡虫啉等3种氯代烟碱类农药多残留速测的异源竞争免疫层析金标试纸条，该试纸条包括衬板、样品垫、金标一抗结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，金标一抗结合垫上包被有胶体金标记的吡虫啉类特异性小鼠单抗，硝酸纤维素膜上包被有用于异源竞争的氯噻啉或噻虫胺人工抗原的检测线和包被有兔抗鼠IgG的质控线。本发明还提供了相应的速测法取茶汤滴加2～3滴到样品垫的点样区中进行层析反应，5～10分钟后根据检测线和质控线的显色情况直接判断样品中农药的阴阳性结果。

主权项

适用于茶叶中吡虫啉、噻虫胺和氯噻啉这3种氯代烟碱类农药多残留速测的异源竞争免疫层析金标试纸条，该试纸条包括衬板(7)、样品垫(1)、金标一抗结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4)，其特征是：所述金标一抗结合垫(2)上包被有胶体金标记的吡虫啉类特异性小鼠单抗，硝酸纤维素膜(3)上包被有用于异源竞争的氯噻啉或噻虫胺人工抗原的检测线(5)和包被有兔抗鼠IgG的质控线(6)；胶体金标记的吡虫啉类特异性小鼠单抗是由20～40nm的纳米金颗粒与吡虫啉类特异性小鼠单抗相结合的复合物，吡虫啉类特异性小鼠单抗与胶体金的结合浓度为3～10mg/L；检测线(5)包被的用于异源竞争的氯噻啉或噻虫胺人工抗原是指将氯噻啉半抗原或噻虫胺半抗原偶联到鸡卵清蛋白(OVA)上的人工抗原，浓度为100～500mg/L；氯噻啉半抗原或噻虫胺半抗原与OVA的偶联比为8:1～15:1；兔抗鼠IgG的质控线(6)的浓度为50～200mg/L；所述检测线(5)和质控线(6)所用的稀释液是质量浓度1～5％蔗糖的0.01M PBS溶液；样品垫(1)的处理，配制20mL封闭液，称取50mg BSA、50mg PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、1000mg蔗糖，将其加入20mL 0.01M PBST中；将上述试剂和溶液充分混合溶解即封闭液配制完成，将样品垫原料浸入封闭液中，待样品垫原料完全吸附封闭液时取出样品垫，并在37℃烘箱中干燥1～3小时，得样品垫(1)；放入封口袋中并保存于玻璃干燥器中备用；所述0.01M PBST为在100mL的0.01M PBS缓冲溶液中加入0.05mL的吐温。