[发明专利]一种具有美白功效的活性多肽的生物发酵制备方法在审
申请号: | 201510611495.6 | 申请日: | 2015-09-23 |
公开(公告)号: | CN105177092A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
发明(设计)人: | 张光亚;葛慧华;林源清 | 申请(专利权)人: | 华侨大学 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12N15/70;C12N15/62 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;姜谧 |
地址: | 362000*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明公开了一种具有美白功效的活性多肽的生物发酵制备方法,包括如下步骤:(1)构建融合蛋白,该融合蛋白包括依次相连的ELP[KV8F-40]、连接肽、肠激酶酶切识别位点和活性多肽decapeptide-12;(2)将上述融合蛋白的氨基酸序列根据大肠杆菌的密码子的偏爱性,合成表达融合蛋白的基因序列;(3)将上述基因序列拼接到大肠杆菌表达载体上,导入大肠杆菌进行诱导表达,破碎菌体、离心,得上清液;(4)在一定的盐离子浓度和缓冲溶液条件下,通过控制步骤(3)所得的上清液的温度使融合蛋白发生相变而聚集,再通过离心纯化得到融合蛋白,即所述具有美白功效的活性多肽。本发明的方法高效、安全、成本低廉。 | ||
搜索关键词: | 一种 具有 功效 活性 多肽 生物 发酵 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种具有美白功效的活性多肽的生物发酵制备方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)构建融合蛋白,该融合蛋白包括依次相连的ELP[KV8F‑40]、连接肽、肠激酶酶切识别位点和活性多肽decapeptide‑12,其中ELP[KV8F‑40]包括如SEQ ID 01所示的氨基酸序列,连接肽包括如SEQ ID 02所示的氨基酸序列,肠激酶酶切识别位点包括如SEQ ID 03所示的氨基酸序列,活性多肽decapeptide‑12包括如SEQ ID 04所示的氨基酸序列;(2)将上述融合蛋白的氨基酸序列根据大肠杆菌的密码子的偏爱性,合成表达融合蛋白的基因序列;(3)将上述基因序列拼接到大肠杆菌表达载体上,导入大肠杆菌进行诱导表达,破碎菌体、离心,得上清液;(4)在一定的盐离子浓度和缓冲溶液条件下,通过控制步骤(3)所得的上清液的温度使融合蛋白发生相变而聚集,再通过离心纯化得到融合蛋白,即所述具有美白功效的活性多肽。
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