[发明专利]检测DERA酶催化醛缩反应液中氯乙醛含量及催化效率的方法

摘要

本发明公开了一种检测DERA酶催化连续醛缩反应液中氯乙醛含量及催化效率的方法，检测反应液中氯乙醛含量的方法包括(1)取反应上清液，加入2，4‑二硝基苯肼，在酸性条件下进行反应，获得样本反应液；(2)向样本反应液中加入碱液继续反应，获得样本待测液；(3)在520～535nm波长下测量样本待测液的吸光度，根据标准曲线计算反应上清液中氯乙醛的含量。然后根据计算参与催化反应的氯乙醛的消耗量来反映DERA酶的催化效率。在528nm下测量样本待测液的吸光度，在该波长下只有氯乙醛参与产生的产物的吸收峰，不存在乙醛参与产生的产物的干扰，测量结果稳定、其准确率和灵敏度均大大提高。

主权项

一种快速检测DERA酶催化效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在反应体系中加入DERA酶、乙醛和氯乙醛，经催化反应后取上清液；(2)检测上清液中氯乙醛的含量；(3)计算得到DERA酶的催化效率K；K＝(A‑B)/A×100％A为反应体系中氯乙醛的初始量，B为催化反应后反应体系中氯乙醛的量；步骤(2)中，检测上清液中氯乙醛的含量的方法，包括以下步骤：1)取反应上清液，加入2，4‑二硝基苯肼，在酸性条件下进行反应，获得样本反应液；2)向样本反应液中加入碱液继续反应，获得样本待测液；3)在528nm波长下测量样本待测液的吸光度，根据标准曲线计算反应上清液中氯乙醛的含量；所述标准曲线的建立方法为：(a)制备一组氯乙醛浓度呈梯度分布的标准品；(b)取各标准品，加入2，4‑二硝基苯肼，在酸性条件下进行反应，再加入碱液继续反应，获得标准品待测液；(c)在528nm的波长下测量标准品待测液的吸光度；(d)根据氯乙醛浓度与吸光度绘制标准曲线。