[发明专利]基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法有效
申请号: | 201510615642.7 | 申请日: | 2015-09-24 |
公开(公告)号: | CN105238815B | 公开(公告)日: | 2018-06-15 |
发明(设计)人: | 刘祥瑞;周雪飞;刘欣;祝鼎成;周珠贤;唐建斌;申有青 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 黄平英 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,包括如下步骤:采用RO‑3306为同步化试剂将目标细胞同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体‑外源目标基因复合物进行基因转染。本发明在基因转染过程中加入RO‑3306将肿瘤细胞同步至G2/M能够很大程度上提高基因转染的效率。 1 | ||
搜索关键词: | 高分子聚合物 基因转染 细胞周期调控 载体基因 转染效率 目标基因 目标细胞 肿瘤细胞 复合物 同步化 外源 | ||
【主权项】:
1.一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:采用RO‑3306为同步化试剂将目标细胞同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体‑外源目标基因复合物进行基因转染;目标细胞同步步骤为:培养目标细胞至细胞贴壁后加入含RO‑3306的血清培养基,进行同步,血清培养基中RO‑3306浓度为8~12uM,同步时间为12~20h;
同步完成后,将含RO‑3306的血清培养基替换为含RO‑3306的无血清培养基,加入高分子聚合物载体‑外源目标基因复合物进行转染,2~3h后再换成含RO‑3306的血清培养基。
2.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,转染时间为12~24h。3.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,所述目标细胞为HeLa细胞。4.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,所述高分子聚合物载体为聚乙烯亚胺。
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