[发明专利]一种水稻Wax-mq基因型的ARMS-Tm-shift-qPCR检测试剂和检测方法在审
申请号: | 201510618135.9 | 申请日: | 2015-09-25 |
公开(公告)号: | CN105238857A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 徐建第;张全芳;杨连群;朱文银;陈峰;吴修;尹亮;步迅 | 申请(专利权)人: | 山东省水稻研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 张菡 |
地址: | 250100 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种水稻Wax-mq基因型的ARMS-Tm-shift-qPCR检测试剂和检测方法;属于生物检测技术领域。本发明所用引物包括:1条野生型GG纯合上游引物、1条突变型AA纯合上游引物和1条通用下游引物。其中,野生型上游引物的3’末端增加有碱基G,3’末端倒数第3位增加一个碱基错配T;从而能特异性扩增野生型基因。突变型上游引物的3’末端增加有碱基A,3’末端倒数第3位增加一个碱基错配A;从而能特异性扩增突变型基因。野生型GG上游引物的5’端添加了14bp的序列;突变型AA上游引物的5’端添加了8bp的短序列;显著扩大了PCR产物Tm值的差距。PCR结束后,通过实时荧光信号的监测来绘制熔解曲线,由此根据不同的Tm值来对SNP进行分型。 | ||
搜索关键词: | 一种 水稻 wax mq 基因型 arms tm shift qpcr 检测 试剂 方法 | ||
【主权项】:
一种水稻Wax‑mq基因型的ARMS‑Tm‑shift‑qPCR检测试剂,其特征在于,包含:引物Wax‑ mqW:5' CGCCCGTCCCGCCG GTTTTTCCATTGCTACAATCG 3',如SEQ ID NO.1所示;引物Wax‑mqM: 5' GATTACCGGTTTTTCCATTGCTACAAACA 3',如SEQ ID NO.2所示;引物Wax‑mqR4: 5' GCGAAAGGTAAACTAATGATGACTCCAC 3',如SEQ ID NO.3所示。
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