[发明专利]Cas9介导的家蚕基因编辑载体和应用有效
申请号: | 201510630939.0 | 申请日: | 2015-09-29 |
公开(公告)号: | CN105132460B | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 潘敏慧;鲁成;董战旗;胡楠;陈婷婷;陈鹏 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;A01K67/04 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 王贵君 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | 本发明公开了Cas9介导的家蚕基因编辑载体,包括组成型基因编辑载体和诱导型基因编辑载体,其中组成型基因编辑载体包括U6启动子调控sgRNA表达的表达框U6‑sgRNA和IE‑1启动子调控Cas9表达的表达框,诱导型基因编辑载体Cas9由Hr3‑39k诱导型启动子调控表达,本发明的Cas9介导的基因编辑载体能够稳定、高效编辑目的基因,为制备昆虫抗病毒转基因素材和具有高效抗病毒的品种提供了有力的工具。 | ||
搜索关键词: | cas9 家蚕 基因 编辑 载体 应用 | ||
【主权项】:
1.Cas9介导的家蚕基因编辑载体,其特征在于:包括U6启动子调控sgRNA表达的表达框U6‑sgRNA,和IE‑1启动子或Hr3‑39k诱导型启动子调控Cas9表达的表达框;所述Cas9的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述表达框U6‑sgRNA含有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,所述IE‑1启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述Hr3‑39k诱导型启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示;所述sgRNA为egfp基因的sgRNA或ie‑1基因的sgRNA;所述egfp基因的sgRNA的核苷酸序列含有如SEQ ID NO.5与SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7与SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9与SEQ ID NO.10所示互补序列;所述ie‑1基因的sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.11与SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13与SEQ ID NO.14或SEQ ID NO.15与SEQ ID NO.16所示的互补序列。
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