[发明专利]一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法在审
| 申请号： | 201510636965.4 | 申请日： | 2015-10-03 |
| 公开（公告）号： | CN105154562A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 钟文文;许俊杰;张海娟;李紫嫣;倪荣;李娇娇 | 申请（专利权）人： | 临沂大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 276000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法，其特征在于：根据Tri5基因信息设计一对特异性引物，该引物具有高度特异性，上游引物tri5S1： 5’-CCT CAC CCT CAG ATG TTG ACA TAC-3’和下游引物：5’-tri5S2： TCC TTG TAG AAG GAC ATG AGG TCG-3’；利用该引物对黑葡萄穗霉菌的总DNA进行PCR扩增。利用琼脂糖凝胶电泳检测产物，分离得到单端孢霉烯族A类毒素菌株的特异性片段，其长度为460bp的条带，而不产单端孢霉烯族A类毒素的黑葡萄穗霉菌中不能扩增到该特异片段；根据产物片段的有无及大小，确定某一黑葡萄穗霉菌是否产单端孢霉烯族A类毒素。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 霉菌 单端孢霉烯族 类毒素 菌株 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种黑葡萄穗霉菌单端孢霉烯族A类毒素菌株的检测方法，其特征在于：1）根据Tri5基因信息设计一对高度特异性引物，上游引物tri5S1: 5’‑ CCT CAC CCT CAG ATG TTG ACA TAC‑3’和下游引物tri5S2: 5’‑ TCCTTGTAGAAGGACATGAGGTCG‑3’；2）利用该引物对黑葡萄穗霉菌的总DNA进行PCR扩增，扩增反应条件为：94℃，10min~94℃，1min，~53℃，30snd，~72℃，1min~4℃，10min，38个循环；3）利用琼脂糖凝胶电泳检测产物，分离得到长度为460bp的条带的单端孢霉烯族A类毒素菌株的特异性片段；4) 根据产物片段的有无，或者能得到的条带片段的长度是否为460bp，判断某一黑葡萄穗霉菌是否产单端孢霉烯族A类毒素。
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