[发明专利]一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法

摘要

本发明公开了一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，步骤是：A、在培养收获的产油微藻的湿藻泥、藻浆、干燥粉或发酵液中依次加入磷酸盐缓冲溶液、生物酶催化剂，搅拌并加热；B、酶催化降解反应完毕后，将反应体系调整pH值，将酶催化降解液温度提高并维持温度；C、待反应完毕后，将酶催化降解体系的温度降低，向反应体系中加入萃取剂进行油脂萃取，再加入破乳剂后通过离心进行分层；D、将分离获得的油相经减压蒸馏或者薄膜蒸发浓缩获得微藻油脂。方法易行，操作简便，针对产油微藻尤其是光合自养型产油微藻的高效破壁提油，降低了微藻提油过程的能量输入，提高了微藻能源的能效比，进而大大降低了微藻生物质能源的综合生产成本。

主权项

一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其步骤是：    A、在培养收获的产油微藻的湿藻泥、藻浆、干燥粉或发酵液中依次加入磷酸盐缓冲溶液、生物酶催化剂，搅拌反应体系并加热至25℃‑60℃，启动微藻细胞壁酶催化降解反应；    B、酶催化降解反应完毕后，将步骤A中的反应体系调整pH值至7.5－9，将酶催化降解液温度提高至70－80℃并维持温度0.5‑4小时；    C、待反应完毕后，将步骤B中酶催化降解体系的温度降低至40℃，并向反应体系中加入萃取剂进行油脂萃取操作，再加入破乳剂后通过离心进行分层；    D、将步骤C中分离获得的油相经减压蒸馏或薄膜蒸发浓缩获得微藻油脂，所述的减压蒸馏：操作温度40‑60℃，真空度10mbar‑500mbar；所述的薄膜蒸发：操作温度为60‑80℃，转膜速度为50‑200rpm，真空度为40mbar‑200mbar；所述的步骤A中的磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01‑0.5M，所述的生物酶催化剂为甲壳素酶与果胶酶、碱性蛋白酶、纤维素酶、酯酶、甘露糖异构化酶、木瓜蛋白酶等生物酶中的一种或二至七种任意混合形成的复合酶；复合酶的用量为微藻干物质重量的0.1%‑3.5%；酶催化降解反应的温度为25℃‑60℃；酶催化降解反应的时间为：0.5小时‑8小时；所述的步骤C中的萃取剂为脂溶性不溶于水的溶剂为正己烷、环己烷、乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚；所述的破乳剂为无机盐溶液，食盐水或甲醇或乙醇。