[发明专利]川油36油菜育性恢复基因及纯度和纯合度检测方法有效
申请号: | 201510673845.1 | 申请日: | 2015-10-15 |
公开(公告)号: | CN105316345B | 公开(公告)日: | 2018-08-28 |
发明(设计)人: | 蒋梁材;柴靓;李浩杰;蒲晓斌;张锦芳;崔成;蒋俊;郑本川 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院作物研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12Q1/6895;C12N15/10 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李进 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明属于作物育种领域,特别是涉及一种川油36油菜育性恢复基因及纯度和纯合度检测方法。川油36油菜育性恢复基因,其碱基序列如SEQ ID No:1所示。利用川油36油菜育性恢复基因检测川油36油菜恢复系纯度的方法包括:提取待检测川油36油菜的总DNA作为模板DNA,以如SEQ ID No:2和SEQ ID No:3所示序列的引物进行PCR,对扩增产物进行电泳检测,并判断待检测川油36油菜是否含有所述油菜育性恢复基因的片段。该方法通过特定的引物,对川油36油菜恢复系进行了分子检测,操作方便,结果可靠。主要操作为田间取样、提取基因组总DNA,PCR扩增及电泳检测;能快速、准确地得到检测结果。 | ||
搜索关键词: | 川油 36 油菜 恢复 基因 纯度 合度 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种获取川油36油菜育性恢复基因的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)、以川油36油菜恢复系为父本,以不育系做母本进行杂交,得到F1代种子后播种,并将处于花期的F1单株套袋自交,得到F2代种子;2)、将F2代种子播种,在花期得到可育单株和不可育单株;3)、分别提取多个所述可育单株、不可育单株的总DNA后进行混合,得到可育混合DNA和不可育混合DNA;4)、分别以所述可育混合DNA和不可育混合DNA为模板,以SSR引物或SRAP引物进行扩增并将产物进行电泳检测,筛选出可育混合DNA能够扩增出,但不可育混合DNA不能扩增出的片段;5)、将所述片段测序后,进行比对,筛选得到目标片段,并以如SEQ ID No:6和SEQ ID No:7所示的引物进行扩增,得到全长的川油36油菜育性恢复基因;所述川油36油菜育性恢复基因的碱基序列如SEQ ID No:1所示。
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