[发明专利]一种葡萄糖基转移酶基因及其制备方法和重组工程菌及其构建方法和应用在审
申请号: | 201510680846.9 | 申请日: | 2015-10-20 |
公开(公告)号: | CN105385700A | 公开(公告)日: | 2016-03-09 |
发明(设计)人: | 陈小龙;王益栋;范永仙;陆跃乐 | 申请(专利权)人: | 德清爵胜生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/10;C12N15/10;C12N1/21;C12N15/70 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
地址: | 313200 浙江省湖*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种葡萄糖基转移酶基因工程菌的构建、表达和应用,所述的葡萄糖基转移酶基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1,其基因来源于Xanthomonas campestris pv.campestris。本发明利用一步法克隆试剂盒用于基因的克隆,并将目的基因连接到pET系列载体中,并导入大肠杆菌Rosetta™(DE3) [F− ompT hsdSB(rB− mB− ) gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)]中。对重组大肠杆菌利用乳糖作为诱导剂进行蛋白表达优化,并对葡萄糖基转移酶催化合成α-熊果苷的酶学性质进行研究。采用本发明优化后生产α-熊果苷的产量达21-30g/L,对苯二酚转化率可达90%以上,且反应时间在2-4h之间,利用此大肠杆菌重组工程菌进行α-熊果苷的生产具有良好的工业前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 葡萄 糖基转移酶 基因 及其 制备 方法 重组 工程 构建 应用 | ||
【主权项】:
一种来源于野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris)的一种葡萄糖基转移酶基因,所述的葡萄糖基转移酶基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1。
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