[发明专利]一种抗凝血肽的酶解制备方法

摘要

一种抗凝血肽的酶解制备方法，本发明属于食源性蛋白深加工技术领域，它为了解决现有以植物蛋白为来源制备得到的凝血酶抑制肽的抑制率较低的问题。制备方法：一、将大豆分离蛋白溶于蒸馏水中，制备得到大豆蛋白溶液；二、大豆蛋白溶液在60～90℃下加热处理，根据所用蛋白酶种类的不同，调节体系的pH，加入蛋白酶进行水解反应，灭酶处理后得到酶解溶液，所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶或复合蛋白酶等；三、过滤酶解溶液；四、进行均质处理；五、对均质后的酶解溶液进行杀菌处理；六、杀菌后的酶解溶液进行干燥处理得到大豆抗凝血肽。本发明以大豆蛋白为原料，得到的大豆抗凝血肽的凝血酶抑制率最高可达40％。

主权项

1.一种抗凝血肽的酶解制备方法，其特征在于是按下列步骤实现：一、将大豆分离蛋白溶于蒸馏水中，制备得到大豆蛋白溶液；二、将步骤一得到的大豆蛋白溶液加热至60~90℃处理5~10min，冷却至室温后调节体系的pH，然后加入蛋白酶进行水解反应，灭酶处理后得到酶解溶液；三、对酶解溶液进行离心处理，收集上清液，然后采用截留分子量小于500 Da的过滤膜进行过滤，得到过滤后的酶解溶液；四、将过滤后的酶解溶液在60~65℃、15~30MPa的条件下进行均质处理，得到均质后的酶解溶液；五、对均质后的酶解溶液进行杀菌处理，得到杀菌后的酶解溶液；六、将杀菌后的酶解溶液进行干燥处理，得到大豆抗凝血肽；其中当步骤二所述的蛋白酶为胃蛋白酶时，水解反应过程是用酸性调节剂调节体系的pH至 1.2~2.5，在30~40℃恒温水浴条件下加入E/S 2.0%~5.0%的胃蛋白酶进行水解反应0.5~4h；当步骤二所述的蛋白酶为胰蛋白酶时，水解反应过程是用碱性调节剂调节体系的pH至7.0~8.0，在30~40℃恒温水浴条件下加入E/S 2.0%~5.0%胰蛋白酶进行水解反应0.5~4h；当步骤二所述的蛋白酶为碱性蛋白酶时，水解反应过程是用碱性调节剂调节体系的pH至 7.5~9.0，在50~65℃恒温水浴条件下加入E/S 2.0%~5.0%碱性蛋白酶进行水解反应0.5~4h，并在水解反应过程中加入碱性调节剂维持体系pH值恒定；当步骤二所述的蛋白酶为胃蛋白酶与胰蛋白酶的复合蛋白酶时，水解反应过程是先用酸性调节剂调节体系的pH至1.2~2.5，在30~40℃恒温水浴条件下加入E/S 2.0%~5.0%胃蛋白酶进行水解0.5~2h，然后用碱性调节剂调节体系的pH至 7.0~8.0，再加入E/S 2.0%~5.0%胰蛋白酶水解1~3h；当步骤二所述的蛋白酶为中性蛋白酶和风味蛋白酶的复合蛋白酶时，水解反应过程是先滴加酸性调节剂或碱性调节剂调节体系的pH至5.0~9.0，在30~60℃的温度下加入E/S 2%~5%作为内肽酶的中性蛋白酶酶解1~3h，然后再加入E/S 2%~5%作为外肽酶的风味蛋白酶酶解1~3h。