[发明专利]一种从人脂肪组织中分离培养内皮克隆形成细胞的方法有效
| 申请号： | 201510698296.3 | 申请日： | 2015-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN105154391B | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 范兆心;陈强;赖真阳 | 申请（专利权）人： | 四川新生命干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从人脂肪组织中分离培养内皮克隆形成细胞的方法，它包括如下步骤：a、取脂肪组织，洗涤，消化，离心，得细胞沉淀；b、清洗步骤a的细胞沉淀，置于含10％FBS的细胞培养基中，培养48小时；c、将步骤b中含10％FBS的细胞培养基更换为EGM2培养基，培养至铺路石样细胞克隆团出现，培养期间每2‑3天换液；d、将EGM2培养基更换为混合培养基，每2天换液，直至细胞汇合度达到80‑90％，即可。本发明还提供了制备得到的内皮克隆形成细胞。应用本发明提供的分离方法，可以从脂肪组织中高效的获得内皮克隆形成细胞；而且本发明方法操作简单、分离培养时间短，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 组织 分离 培养 内皮 克隆 形成 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从人脂肪组织中分离培养内皮克隆形成细胞的方法，其特征在于，它包括如下步骤：a、取脂肪组织，洗涤，消化,离心，得细胞沉淀；b、清洗步骤a的细胞沉淀，置于含10％FBS的细胞培养基中，培养48小时；c、将步骤b中含10％FBS的细胞培养基更换为EGM2培养基，培养至铺路石样细胞克隆团出现，培养期间每2‑3天换液；d、将EGM2培养基更换为混合培养基，每2天换液，直至细胞汇合度达到80‑90％，即可；其中，混合培养基由等体积的EGM2培养基与含10％FBS的细胞培养基组成；步骤b和/或d中，所述细胞培养基为DMEM/F12。
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