[发明专利]一种使用UPC2-ELSD测定分子蒸馏单硬脂酸甘油酯中单甘酯的方法

摘要

本发明公开了一种使用UPC²‑ELSD测定分子蒸馏单硬脂酸甘油酯中单甘酯的方法，通过蒸发光散射检测器，外标法定量，进而得出单甘酯的含量，本发明采用UPC²‑ELSD法测定分子蒸馏单硬脂酸甘油酯中主要单甘酯的含量，分析时间大大缩短，且无需繁琐的样品衍生化前处理，采用超临界CO₂作主要流动相，运行成本低，更加符合绿色环保分析检测的要求，实现了高分离度、高灵敏度和高分析速度的目标。

主权项

1.一种使用UPC2‑ELSD测定分子蒸馏单硬脂酸甘油酯中单甘酯的方法，其特征在于，(1)样品的制备，分别准确称取0.01g分子蒸馏单硬脂酸甘油酯样品于100mL容量瓶中，其准确称取精确至0.0001g，用体积比为7:3的正己烷/异丙醇溶解后并定容，溶液经有机膜过滤后直接进行UPC2分析；(2)标准工作溶液的配制，首先配制4种单甘酯的标准品储备液，分别准确称取30mg的1‑单软脂酸甘油酯、30mg的1‑单硬脂酸甘油酯和3.0mg的2‑单软脂酸甘油酯、3.0mg的2‑单硬脂酸甘油酯至不同的10mL容量瓶中，上述溶液准确称取精确至0.1mg，之后用体积比为7:3的正己烷/异丙醇溶解并定容，配成浓度为3000mg/L的1‑单甘酯和300mg/L的2‑单甘酯的单一标准品储备液，其次配制4种单甘酯的混合标准溶液，分别移取5mL 3000mg/L的1‑单软脂酸甘油酯、5mL 3000mg/L的1‑单硬脂酸甘油酯和5mL 300mg/L的2‑单软脂酸甘油酯、5mL 300mg/L的2‑单硬脂酸甘油酯的单标准品储备液于10mL容量瓶中，用体积比为7:3的正己烷/异丙醇定容，依次配成浓度为1500mg/L的1‑单软脂酸甘油酯、1500mg/L的1‑单硬脂酸甘油酯、150mg/L的2‑单软脂酸甘油酯、150mg/L的2‑单硬脂酸甘油酯的混合标准溶液，最后再配制系列标准工作溶液，准确移取5mL混合标准溶液于10mL容量瓶中，用体积比为7:3的正己烷/异丙醇定容，再逐级稀释，即得系列标准工作溶液，1‑单软脂酸甘油酯和1‑单硬脂酸甘油酯的浓度为50mg/L、125mg/L、250mg/L、500mg/L、750mg/L，2‑单软脂酸甘油酯和2‑单硬脂酸甘油酯的浓度为5mg/L、12.5mg/L、25mg/L、50mg/L、75mg/L；(3)UPC2‑ELSD测定方法，利用超高效合相色谱‑蒸发光散射检测器对标准工作溶液和样品溶液进行检测，条件如下：色谱柱：ACQUITY UPC2BEH 2‑EP色谱柱，规格为100mm×2.1mm、1.7μm，柱温：45℃，样品室温度：10℃，流动相A：超临界CO2，流动相B：甲醇:乙腈，比例为1:1、v/v，洗脱梯度：见表1，背压：1750psi，流速：1.0mL/min，进样体积：1μL，ELSD检测器：载气压力0.5MPa，漂移管温度为50℃；表1时间(min)A(％)B(％)曲线初始973初始297363955658812669736(4)分子蒸馏单硬脂酸甘油酯样品中主要单甘酯的测定结果的计算，采用超高效合相色谱进行分离，蒸发光散射检测器进行检测，外标法定量，以峰面积(Y)对质量浓度进行线性回归，得到线性回归方程，对配制好的单硬脂酸甘油酯样品进行测定，通过Empower 3.0软件，自动分别得到样品中的1‑单软脂酸甘油酯、1‑单硬脂酸甘油酯、2‑单软脂酸甘油酯和2‑单硬脂酸甘油酯的含量，再换算成百分比含量(％)，其计算公式为：式中：X—单硬脂酸甘油酯样品中4种单甘酯的百分比含量，单位为％，w—外标法测定样品中4种单甘酯的含量，单位为mg/L，m—样品的配制浓度，单位为mg/L。