[发明专利]一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法

摘要

一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法，是将转化的稻瘟病菌菌丝于培养基中倒置黑暗培养后，无菌条件下，挑取菌丝置于加入有DNA提取缓冲液的96孔PCR板中，再将该PCR板于水浴恒温处理，取出PCR板，常温冷却，即可作为转化子鉴定的DNA模板，直接用于PCR扩增。本方法直接用培养基上的菌丝，除去了繁琐的操作步骤，仅需一步就能提取稻瘟病菌丝的DNA从而准确的鉴定转化子，整个过程简单快速。采用本方法，提取的DNA质量较高，可快速对大批量的转化子进行鉴定，为快速开展稻瘟病菌致病性变异机制研究提供了重要技术支撑。

主权项

一种基于转化子鉴定的稻瘟病菌菌丝DNA的快速提取方法，其特征在于，该方法是将转化的稻瘟病菌菌丝进行培养后，无菌条件下挑取1mg菌丝置于加入有DNA提取缓冲液的96孔PCR板中，再将该PCR板于95‑100℃水浴处理8‑10min，取出PCR板，常温冷却，即可；其中，上述DNA提取缓冲液是0.5ml 1M pH＝8.0的Tris‑HCl、0.1ml 0.5M pH＝8.0的EDTA和1ml 2％的Triton X‑100加ddH₂O定容至50ml配制而成；上述PCR板中DNA提取缓冲液的加入量是根据转化子的数量，每孔加入30ulDNA提取缓冲液。