[发明专利]一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法

摘要

本法发明公布了一种利用菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，所述生产高品质低聚果糖的酶解工艺包括最优的菊芋添加量，pH，缓冲液浓度，酶的添加量，温度，搅拌速度和反应时间。所形成的酶解工艺可以实现低聚果糖占总糖含量达95.78％以上的高效生产过程。本发明所述使用的菊粉酶是一种新型的菊粉酶突变体，具有较高的酶活，30m3体系下发酵液酶活达60000U/mL，可显著提高菊粉酶的生产效率，降低生产成本。本发明形成的低聚果糖的酶解工艺是一种新工艺，采用该工艺制备低聚果糖可以大大降低操作难度，节约经济成本。

主权项

1.一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，其特征在于，具体如下：以新鲜菊芋为原料，灭酶打浆后浸提2‑8h，收集清液，清液经碱处理、除杂并脱色后作为反应原液，调节pH 4.5～6.0，按每Kg菊芋添加菊粉酶650000～2000000U，控制温度在30℃，搅拌速度在50～200r/min的条件下反应4～12h，当低聚果糖最大聚合度降低到5时，停止反应，将水解物进行浓缩，干燥即为低聚果糖产品；在37℃、pH＝5.0的条件下，1mL酶液在1h内水解菊芋果聚糖产生1μmol的三糖定义为一个酶活力单位U，其中三糖含果三糖和蔗果三糖；所述菊粉酶氨基酸序列如核苷酸序列表SEQ ID No.5所示。