[发明专利]小分子量透明质酸的制备方法与应用及透明质酸裂解酶基因载体和工程菌在审
| 申请号： | 201510734368.5 | 申请日： | 2015-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN105274127A | 公开（公告）日： | 2016-01-27 |
| 发明（设计）人： | 刘浩;张海洋 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N9/88;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津诺德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 12213 | 代理人： | 栾志超 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供小分子量透明质酸的制备方法与应用及透明质酸裂解酶基因载体和工程菌，通过克隆兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)ATCC39920基因组中编码透明质酸裂解酶基因(hylb)部分片段，并构建表达载体pET28a:hylb,将构建成功的表达载体化转至大肠杆菌BL21(DE3),通过对大肠杆菌诱导表达获得高活性可溶的透明质酸裂解酶。纯化后的酶液通过N-acetyl-glucosamine(NAG)测定法测得比酶活为4655U/mg(相当于4.655×107IU/mg)。并通过控制酶含量和反应条件去降解大分子量透明质酸来制备小分子量透明质酸，利用特性粘度法和琼脂糖凝胶电泳法测定透明质酸分子量，得到分子量为6000Da级别的小分子量透明质酸，红外图谱与国家药典标准图谱一致。 | ||
| 搜索关键词： | 分子量 透明 制备 方法 应用 裂解 基因 载体 工程 | ||
【主权项】：
透明质酸裂解酶基因载体，其特征在于：所述基因载体将长度为2208bp的hylb基因插入载体pET28a中，形成载体pET28a::hylb。
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