[发明专利]一种制备基因DNA探针文库的方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201510746932.5 | 申请日： | 2015-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN105297145B | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 蔡万世;王瑞超;屈武斌;杭兴宜 | 申请（专利权）人： | 艾吉泰康生物科技(北京)有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京汇知杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11587 | 代理人： | 蔡伦;吴焕芳 |
| 地址： | 100012 北京市朝阳区大屯*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种遗传代谢病的筛查方法和试剂盒。所述方法和试剂盒包括构建如下文库：针对遗传代谢病相关致病基因的每个编码序列，由5’往3’方向，按照序列反向互补的原则，从第一个碱基开始设计长度为120bp的探针序列，并且每两个相邻的探针序列之间存在60bp的重叠；在每个探针序列的5’端和3’端，分别添加TAGGTGTGTAGGCGC和GTCAGCTAGTACGCA序列；采用寡核苷酸原位合成技术，在芯片上进行寡核苷酸的大规模合成；用氨水将芯片上的寡核苷酸洗脱下来，溶于水中，形成寡核苷酸混合物；通过PCR的方法，采用5’端带有生物素标记的正向引物(TTAGATAGGTGTGTAGGCGC)和反向引物(TAAGGTGCGTACTAGCTGAC)，对寡核苷酸混合物进行扩增，形成带生物素标记的遗传代谢病相关致病基因DNA探针文库。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 遗传 谢病 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种制备基因DNA探针文库的方法，所述基因为遗传代谢病相关致病基因，所述方法包括：1)针对所述基因的编码序列，由5’往3’方向，按照序列反向互补的原则，从第一个碱基开始设计等长的探针序列，长度为110‑130bp，并且每两个相邻的探针序列之间存在重叠，所述每两个相邻的探针序列之间重叠长度是所述探针长度的1/2或2/3；2)在每个探针序列的5’端和3’端，分别添加SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2序列，形成两端带有同样序列的探针序列；3)合成步骤2)形成的所述探针序列，形成寡核苷酸混合物；4)通过PCR的方法，采用5’端均带有标记的正向引物SEQ ID NO.3和反向引物SEQ ID NO.4，对所述寡核苷酸混合物进行扩增，形成带标记的基因DNA探针文库。
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