[发明专利]口腔致病菌多重PCR检测引物组和探针组及其应用有效
申请号: | 201510748326.7 | 申请日: | 2015-11-06 |
公开(公告)号: | CN105256048B | 公开(公告)日: | 2020-07-21 |
发明(设计)人: | 刘旭宏 | 申请(专利权)人: | 厦门基科生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/14;C12Q1/04;C12R1/145;C12R1/46;C12R1/445;C12R1/01 |
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地址: | 361001 福建省厦门*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发名公开了口腔致病菌多重PCR检测引物组和探针组及其应用,采用多重PCR同时扩增口腔致病菌中的牙龈卟啉单胞菌、幽门螺旋杆菌、具核梭杆菌、变形链球菌、金黄色葡萄球菌的特异靶序列,再通过改良Taqman探针熔解曲线分析鉴定,实现对于五种口腔常见致病菌多重检测;采用多重PCR检测操作简单、检测周期短,不会出现假阳性,同时还无需开管操作,可重复使用,节约了资源节省了成本,检测灵敏性特异性高。 | ||
搜索关键词: | 口腔 致病菌 多重 pcr 检测 引物 探针 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种基于熔解曲线分析的口腔致病菌多重PCR检测方法,其特征在于:采用多重PCR同时扩增口腔致病菌中的牙龈卟啉单胞菌、幽门螺旋杆菌、具核梭杆菌、变形链球菌、金黄色葡萄球菌的特异靶序列,再通过改良Taqman探针熔解曲线分析鉴定,实现对于五种口腔常见致病菌多重检测,具体包括以下三个步骤:1)在需要检测五种口腔致病菌特异靶序列的区域分别设计并制备五条改良的Taqman探针;2)在每一个设计好的改良Taqman探针外围分别设计一对引物,包括一条上游引物和下游引物,用该对引物对特异靶序列进行单重单色或多重多色实时荧光定量PCR扩增反应;3)实时荧光PCR扩增反应后进行熔解曲线分析,根据改良Taqman探针熔点的变化来判断待检测核酸序列是否存在以上五种口腔致病菌及其类型。
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