[发明专利]一种中温碱性脂酶及其制备方法与应用在审
申请号: | 201510757455.2 | 申请日: | 2015-11-09 |
公开(公告)号: | CN105255917A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 李富超;赵瑾;齐宏涛;张好;陈华新;姜鹏 | 申请(专利权)人: | 中国科学院海洋研究所 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李颖 |
地址: | 266071*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明属于基因工程领域,涉及一种具有新基因序列的中温碱性酯酶、其制备方法及应用。中温碱性脂酶est424为SEQ ID No.1中碱基所示序列。所述中温碱性脂酶基因编码的蛋白为SEQ ID No.2中氨基酸所示序列。基因est424,长度为924bp,编码307个氨基酸。利用pET28系统构建酯酶重组表达载体,为避免包涵体的形成,将分子伴侣蛋白dnaK-dnaJ-grpE与酯酶表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中进行共转化并诱导表达,获得可溶性的35kDa重组酯酶蛋白。用Ni+亲和层析系统,对重组酯酶est424进行分离纯化。该酯酶最适反应温度为35℃,最适反应pH值为8.0,酶活单位为171.03U/mg。 | ||
搜索关键词: | 一种 碱性 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种中温碱性脂酶基因,其特征在于:中温碱性脂酶est424为SEQ ID No.1中碱基所示序列。
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