[发明专利]一种经血宁胶囊的质量检测方法

摘要

本发明涉及一种经血宁胶囊的质量检测方法，属于中药技术领域。包括用薄层色谱法鉴别定性其主要成分白背叶和扶芳藤；用紫外‑分光光度法测定经血宁胶囊中总黄酮的含量；用高效液相色谱法测定山奈酚‑3,7‑二鼠李糖苷和芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷的含量，总黄酮含量（以无水芦丁计）每粒经血宁胶囊（0.35g）含量不低于56mg，山奈酚‑3,7‑二鼠李糖苷和芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷的含量每粒不低于0.30mg和4.5mg，本方法首次使用定性鉴别和定量检测的方法对经血宁胶囊进行检测，保证了质量检测标准的准确性、先进性和有效性。

主权项

一种经血宁胶囊的质量检测方法，其特征在于：包括以下三种检测过程：（1）用薄层色谱法鉴别定性；（2）用紫外‑分光光度法测定总黄酮中芦丁成分的含量；（3）用高效液相色谱法测定山奈酚‑3, 7‑二鼠李糖苷和芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷两种成分的含量；薄层色谱法鉴别扶芳藤、白背叶的方法如下：a供试品溶液制备：取本品内容物2g，置50ml圆底烧瓶中，加水4ml，搅拌，制成流动膏状物，加乙酸乙酯20ml，70℃水浴回流2小时，放冷过滤，将滤液移至分液漏斗，吸取上层乙酸乙酯层，浓缩至4ml，备用；b对照溶液制备：取扶芳藤对照药材2g，加70%乙醇30ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，药渣用70%乙醇洗3次，每次10ml，合并乙醇溶液，蒸干，残渣加30ml水溶解，用乙酸乙酯萃取3次，每次20ml，回收乙酸乙酯，残渣加甲醇1ml使之溶解，制成扶芳藤对照药材溶液，备用；取白背叶对照药材1g，按“扶芳藤对照药材溶液的制备方法”制成白背叶对照药材溶液，备用；取山奈酚‑3，7‑二鼠李糖苷、山奈酚‑3, 7‑(4′‑乙酰基)‑O‑α‑L‑二鼠李糖苷和芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷对照品，加甲醇制成1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液，备用；薄层色谱法试验：按中国药典2010版 附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、上述两种对照药材溶液和对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿‑甲醇‑乙酸体积比=40∶10∶0.1为展开剂展开，取出晾干；在254nm紫外灯下观察；在供试品色谱中，与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；所述紫外‑分光光度法测定总黄酮以芦丁计含量的方法如下：a对照品溶液的制备取干燥至恒重的芦丁对照品30mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，制成每1ml含0.3mg的芦丁标准品溶液；精密量取10ml溶液，置50ml量瓶中，加60%乙醇至刻度，摇匀，即得，此时，每1ml含无水芦丁60μg；b标准曲线绘制分别精密吸取芦丁对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别置10ml量瓶中，各加0.1mol/L三氯化铝溶液2ml、1mol/L醋酸钾溶液3ml，加60%乙醇至刻度，摇匀，放置30分钟；以相应试剂为空白，立即按照《中国药典》2010年版一部，附录VA中记载的紫外‑可见分光光度法，在420nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线；c供试品溶液制备取本品内容物0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，加60%乙醇7ml，置水浴上微热，并时时振摇30分钟，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀；精密量取溶液1ml，置10ml量瓶中，加0.1mol/L三氯化铝溶液2ml、1mol/L醋酸钾溶液3ml，加60％乙醇至刻度，摇匀，放置30分钟，离心取上清液作供试品溶液，备用；另取本品内容物0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，加60%乙醇稀释至刻度，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加60%乙醇至刻度，摇匀，作为空白溶液，依法测定吸光度，从标准曲线上读出样品总黄酮的含量；每粒经血宁胶囊0.35g含总黄酮以无水芦丁（C27H30O16）计，不得少于56.0mg；所述高效液相色谱法测定山奈酚‑3, 7‑二鼠李糖苷和芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷的含量方法如下：a色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈‑甲醇=10：2 (V/V) 为流动相A；水‑磷酸=100：0.05 (V/V) 为流动相B，按如下方式进行梯度洗脱：0min： A‑B为16：84；25min： A‑B为20：80；50min：A‑B为40:60；80min：A‑B为80:20；检测波长为340 nm，理论塔板数按山奈酚‑3, 7‑二鼠李糖苷计算应不低于3000；b对照品溶液的制备分别精密称取对照品山奈酚‑3, 7‑二鼠李糖苷8.8mg、芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷2.5mg，分别置于10ml容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，分别制成每1ml中含0.88mg和0.25mg的溶液，作为对照品溶液；c供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加60%甲醇25ml，称定重量，水浴回流30分钟，放冷，用60%甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，即得；d测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得；每粒经血宁胶囊，重量0.35g，含扶芳藤以山奈酚‑3，7‑二鼠李糖苷（C27H30O16）计，不少于0.30mg;，每粒经血宁胶囊，重量0.35g，含白背叶以芹菜素‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷计，不少于4.5mg。